Calypso生物大分子相...

Calypso生物大分子相互作用分析仪技术特点

参考成交价格: 80~100万元[人民币]
技术特点

【技术特点】-- Calypso生物大分子相互作用分析仪

合成梯度-多角度光散射检测器


Calypso®自动成分梯度与MALS检测器(CG-MALS)一起用于表征生物分子间的相互作用、无标签和无固定化。CG-MALS决定了平衡离解常数、自缔合和杂缔合以及更复杂的相互作用。

也可用于绘制Zimm图、dn/dc分析、反应动力学和聚合物相互作用分析的自动化。


蛋白质 - 蛋白质或其他大分子相互作用的无标记,无固定化表征,具有成分梯度的多角度光散射。

CG-MALS

Calypso®II与DAWN® 或 miniDAWN®MALS检测器结合使用,可测量复杂生物分子相互作用的结合亲和力和绝对分子化学计量。


Weight-Average Molar Mass

除了平衡结合常数Kd和可逆的自缔合和杂缔合的绝对化学计量外,它还可以帮助确定反应或聚集速率,非特异性相互作用参数(病毒系数),甚至可以自动测量聚合物重均摩尔质量和dn/dc


CALYPSO Software

每个Calypso都随附有一个CALYPSO software的备份,这是最通用的软件包,可用于通过光散射分析溶液中的生物分子相互作用。


产品描述

1711246439757883.jpg

Creating composition gradients...

CG-MALS由一台可以连接到MALS仪器的 Calypso 和可选的浓度检测器组成。 Calypso可以进行样品的制备和输送,并根据比例帮助精确混合多达三种不同的溶液,然后注入检测器中。

通过将Calypso的泵设置为适当的流量比可以得到准确的成分,所有这些都由CALYPSO™软件通过直观的GUI控制。 混合是通过静态混合器同时从所有三个泵中分配溶液来实现的。

...that work with MALS detectors

可靠的光散射测量要求对样品进行脱气和过滤。 Calypso包含内置的小体积脱气机和过滤器外壳,通过PEEK管道和手拧接头进行连接。 甚至过滤器外壳也是用手拧紧的,采用了专有设计,以提供最大的便利。

Calypso features

  • B生物相容性润湿材料。

  • 可以灵活地重组流体路径,并根据需要使用不同的润湿材料。

  • 通过锥形管方便地加载样品或稀释液:5、15、50 mL。

  • 自动注入触点闭合信号,触发ASTRA® 或 DYNAMICS®软件的数据采集,用于CALYPSO软件不支持的数据采集和分析(例如,DLS采集)。

  • 内置的清洗口,允许泵吸取清洗液进行实验后清洗。将 Orbit 溶剂选择阀 添加到设置中时,可实现两种全自动的不同顺序的清洗方式,例如:缓冲液(清洗蛋白质)和水(清洗缓冲盐)或洗涤剂和水。这些操作可以被附加到无人参与操作的方法中,节约时间。



CG-MALS

Label-free, immobilization-free

成分梯度多角度光散射(CG-MALS)使用一系列不同成分或浓度的未分级样品,以表征各种大分子相互作用。 无需进行特殊修改(例如,标记样品或固定程序):样品未标记且完全在溶液中。

解决一系列生物分子现象

Calypso硬件和软件支持的主要分析技术是:

  • 动态平衡:蛋白质,寡核苷酸和其他生物分子的特异性结合和复杂组装; 从picomolars 到 millimolars 的 KD(平衡解离常数); 缔合复合物的绝对分子化学计量; self and/or heteroassociations

  • 非特异性大分子相互作用: 自维里系数和交叉维里系数

  • 停流动力学:聚集,解离和其他与时间有关的反应:平衡时间从数秒到数小时

  • Zimm图: 利用浓度梯度可以帮助确定溶液中样品的平均摩尔质量MW,尺寸 Rg 和第二维里系数

  • 折射率增量: dn/dc


Calypso的自动化提高了生产率,而CALYPSO软件则提供了无与伦比的交互模型选择。 相对于其他表征蛋白质相互作用的技术,例如表面等离振子共振,沉降平衡,动力学排斥或等温滴定量热法,以及手动CG-MALS测量,Calypso可以提供快速而准确的结果。

Applications

Drug Discovery

  • 量化酶/抑制剂或抗体/抗原相互作用的结合亲和力和化学计量,包括复杂的多价和多蛋白复合物形成

  • 研究小分子对蛋白质-蛋白质相互作用的影响


Process Improvement

  • 确定第二维里系数并调整缓冲液参数以提高配方稳定性和粘度

  • 确定交叉维里系数以优化抗体纯化并了解大型辅料对制剂的影响


Self-assembly / Aggregation

  • 量化溶剂离子强度,pH或赋形剂对聚合或蛋白质缔合的影响

  • 通过摩尔质量和回转半径的变化率以及流体动力学半径(可使用WyattQELS模块或NanoStar通过ASTRA 或 DYNAMICS进行分析)来测量自组装和聚集动力学


Biotech R&D

  • 在各种缓冲液组成,时间和温度范围内表征大分子结合亲和力和相关的复杂化学计量


技术

Deceptively simple

从概念上讲,Calypso “只是”一个装有注射泵和管路的盒子,对吗?好吧,这就是我们所想的-直到我们遭遇到挑战性的生物分子相互作用研究和精密的光散射仪器的需求。它可以同时实现:

  • 高精准度

  • 最小样品消耗

  • 从肽到高浓度单克隆抗体到纳米凝胶的相容性

  • 亲和力范围从pM到mM

尽管我们仍然在资金和消耗品方面提供了卓越的易用性、准确性和合理的成本,但我们不得不扩大现有技术的限制。

We worked hard, so you don't have to

我们不遗余力地寻找满足我们所有需求的稀有部件,如独一无二的注射泵和压力传感器,以及难以购买的30纳米孔径、滤膜和低体积、高效脱气器。我们买不到的东西,我们就从零开始创新和设计。

用户对我们独特的,超低死体积的,手紧式过滤器外壳感到特别满意,这有助于确保为高亲和力分析提供足够的溶液清洁度,且仅保留很少的样品。 与供应商共同开发了特殊的阀门和注射器,以最大限度地提高注射器泵的性能和易用性。

认识到CG-MALS对于大多数用户来说并不熟悉,我们还开发了教程,应用程序指南,方法模板以及其他支持资料和培训,以帮助您入门并保持仪器的正常使用。 充分利用这种惊人的强大技术-我们随时为您提供帮助。

Some additional Calypso features

对布局和设计进行了微调,以减少样品使用量,同时提高自动化程度并保持与MALS检测器的终极产品DAWN 和 miniDAWN的兼容性。 Calypso的特殊功能包括:

  • 大多数管是内径为0.010英寸的PEEK管(0.25毫米),以实现生物相容性和小体积。对于非水溶液,可以更改为PTFE或不锈钢管,对于粘性溶液,可以更改为更大内径的管路。

  • 多种注射器尺寸以满足特定需求

  • 样品和缓冲液的在线脱气

  • 易于检修所有管路和过滤器,以便快速维护

  • 压力警告指示何时滤膜饱和或毛细管堵塞


配置

Protein-Ligand Binding

大多数蛋白质-配体和类似的生物分子相互作用最好在1 mg / mL或以下测量。 CG-MALS配置应包括:

  • Calypso

  • DAWN H/C 用于调节相互作用的温度和最高灵敏度,尽管miniDAWN (仅环境温度)可能就足够了

  • 第三方在线紫外线/可见光吸收检测器-有关推荐型号,请联系工作人员

Non-Specific Interactions

非特异性相互作用通常在1-25 mg / mL范围内测量。 配置应包括:

  • Calypso

  • DAWN H/C 使用在测量Rg > 40 nm的温度敏感样品或聚合物时;否则使用miniDAWN

  • 用于浓度测量的Optilab

High-Concentration Protein-Protein Interactions

可能达到数百毫克/毫升蛋白质的浓度时,应采用:

  • Calypso

  • DAWN H/C 使用在测量Rg > 40 nm的温度敏感样品或聚合物时;否则使用miniDAWN

  • Optilab HC (高浓度选件),用于浓度测量

  • microCuvette 适用于浓缩,粘性溶液,无法通过 Calypso 和 MALS 的流通池时


检测器

MALS

DAWN - 最灵敏的MALS检测器。 结合18个角度的检测器来确定200 Da ~ 1 GDa的摩尔质量和10 ~ 500 nm半径的分子。

  • 制冷/加热型:-15 ~ 150 ℃

DAWN提供了处理荧光样品的特殊选项:荧光滤光片和785 nm红外激光。

miniDAWN - 灵敏度仅次于DAWN。 结合3个角度的检测器以确定摩尔质量从200 Da ~10 MDa,半径从10 ~ 50 nm的分子。 仅环境温度。

Options

WyattQELS - 集成在DAWN或miniDAWN内部的动态光散射(DLS)模块,可以在相同散射体积下同时进行DLS测量。 光纤可以取代了任何一个MALS检测角。

Accessories

Orbit - Orbit 通过以编程方式将溶剂引导至废液瓶或返回溶剂储罐,有助于节省流动相。 与Calypso结合使用时,Orbit 可以通过编程方式从两种清洗液中选择一种,以增强实验后的自动化清洗效果。

Solaris - 高效防止溶剂中细菌,真菌或藻类的生长,并保护系统免受由于污染而导致的停机。

dRI

Optilab - 独特的在线示差折光仪,可用于测量任何大分子的浓度,而与荧光发色基团无关。 高浓度的Optilab可测量高达180 mg / mL蛋白质的浓度。


软件

CALYPSO - CG-MALS实验模拟与方法设计;Calypso流体控制与MALS/dRI数据采集;平衡离解常数Kd、绝对分子化学计量等参数测定的数据分析。


配件

1711246630843144.jpg

规格

注射泵3组由计算机控制的泵;直流伺服电动机,用于最小脉动; 每个泵具备三通分配阀,用于输入,输出和冲洗
注射泵体积12.5 µL ~ 2.5 mL (标准配备1 mL和0.5 mL注射泵)
脱气机通道每个泵1个,内部容积60 µL
极限压力1 mL注射泵:200 psi
0.5 mL注射泵:400 psi
辅助输入/输出自动进样,进样阀控制,循环阀控制,数字和模拟I / O,用于特定应用
溶剂类水性的
湿润材料硼硅酸盐玻璃,PEEK,PTFE,聚乙烯,氧化铝,钛,不锈钢
每次分析的典型样品量2.5 ~ 7 mL,取决于检测器配置和分析的复杂性
测量范围

平衡解离常数,KD:100 kDa分子通常为100 pM至1 mM(实际范围随分子量和缔合化学计量而变化)

测量的可重复性

Mw: ± 5%
A2: ±50 x 100 kDa样品摩尔质量时,±0.5 x 10 -4 mol·mL
log(KD): ± 0.3

分析
特异结合有关更多详细信息,请参见 CALYPSO 软件
  • Self-association

  • Hetero-association

  • 多价

  • Combined self- and hetero-association

  • incompetent (inactive) fraction

  • 合作与竞争作用力

  • 与热力学非理想结合(高浓度)

  • 连接多个数据集以进行整体拟合

非特异性相互作用
  • 自我相互作用:2nd and 3rd v维里系数

  • 异质相互作用: 具有2nd维利系数的交叉维利系数

动力学

1st-在软件阶分析; 导出高阶动力学数据

附加分析dn/dc
主机要求用于Calypso以太网连接的USB端口
用于DAWN / miniDAWN的通信
Dimensions58 cm (长) x 37 cm (宽) x 35 cm (高)

电脑配置要求可在计算机需求中找到。

规格如有更改,恕不另行通知。


定量的表征生物大分子间的相互作用,如抗原/抗体、酶/抑制剂、蛋白质/多糖等重要生物学体系,是生命科学研究及生物技术研究的关键。

Calypso是一个以组分-梯度多角度光散射(CG-MALLS)为基础的生物大分子间相互作用分析系统,可以快速、自动、无损、定量的表征大分子间的相互作用,具有重复性高、灵敏度高及无需样品修饰等诸多优点。该系统可以分析分子间的特异性及非特异性相互作用,聚集或解离的动力学等。对于分子间的特异性相互作用,Calypso可以测定其自聚作用及不同样品分子间的异聚作用,得到平衡解离常数Kd及反应的化学计量数。对于非特异性相互作用,可以测定其维力系数,并判断分子间的作用力及强度。此外,Calypso还可以测定反应的动力学,样品的重均分子量及均方根半径等重要分子信息。
Calypso分析系统无需对样品进行修饰(荧光标记、固定化等),且在溶液环境中测量,因此可以最大程度的保证样品的天然状态,从而得到其他技术难以得到的结果,最真实的表征生物大分子间的相互作用,样品方便回收。
Calypso分析系统的工作原理:组分-梯度多角度光散射(CG-MALS)是最新的分析技术之一,利用分子量的变化测定分子间的相互作用。溶液中大分子的散射光强依赖于物质的浓度C和重均分子量Mw,分子间发生复合,Mw则增加。例如,若所有的蛋白质分子以二聚体形式出现,则散射光强也会增倍。对于可逆的聚集,蛋白与单体蛋白复合的比例会达到一个平衡值,这个值依赖于每种蛋白初始的浓度和缓冲液的条件。不同的组成和浓度会导致Mw不同。通过分析一系列不同组成和浓度的光散射结果,可以确定所发生的聚集形式、各自的结合亲和力Ka、结合和解离平衡常数。手动配制比例及测量是一项繁琐、费时间且容易产生操作误差的工作,Calypso系统通过自动化的过程克服了CG-MALS手动操作的困难,将样品配制、输送及数据的采集和分析集合于一体,完美的保证了实验的重复性,并解决了人工配制样品时引入操作误差的问题。

技术优势
1. 智能化配样,消除了手动配样时的误差问题;
2. 样品直接测试,无需标记化或固定化,最大程度的保证了样品的天然状态;
3. 快速的测定时间,半小时即可测得实验结果;
4. 适用于各类生物反应体系的测定;
5. 体系中自聚及不同样品分子异聚的分析;
6. 化学计量点,平衡常数的分析,平衡常数范围:pM – mM;
7. 反应动力学的分析;
8. 与激光检测器、浓度检测器联用,快速测定物质的Mw、Rg、A2、A3;获取Zimm图;

应用领域:
1. 酶反应体系:酶与抑制剂的相互作用,酶促动力学等
2. 药物探索:药物对蛋白质间相互作用的影响等
3. 免疫研究:抗原/抗体的相互作用等
4. 方法改进:测定及调整第二维力系数,帮助纯化抗体,确定多聚体的组成,确定样品的最优溶解条件等。
5. 结合特异性:化学计量点,平衡常数,离子强度、pH或者辅料对多聚物或者蛋白结合的影响等。
6. 多分子复合物的结构分析:在一系列缓冲溶液、时间、温度变化下,表征大分子聚集过程中分子间的结合强度, 以及确定其化学计量关系,通过Mw及Rg判断其空间构型。


CALYPSO

全面的相互作用分析。

CALYPSO 是一款多功能的独特工具,可使用成分梯度多角度静态光散射(CG-MALS)快速而可靠地表征各种分子相互作用。 CALYPSO软件集成了智能方法设计,简单的硬件操作和强大的数据采集功能,从而使实验顺利进行。 一旦测量完成,直观的图形用户界面便会引导用户逐步进行数据处理,以进行快速而强大的大分子相互作用分析。 并了解如何探索大分子之间的相互作用。

1682675154800031.jpg

Program comprehensive methods for analyzing self- and hetero-association


分析

特异性、可逆的相互作用-蛋白质结合研究

CALYPSO软件使用CG-MALS数据来计算溶液中形成的特定可逆复合物的亲和力和化学计量,例如抗体-抗原相互作用和蛋白质二聚化。 该软件可将数据快速拟合为二聚体形成,1:n化学计量比和无限自缔合的简单模型。 另外,功能强大的分析工具使您可以选择和设计更复杂的绑定方案,包括同时进行自我关联和异质关联,协同性和元复杂形成。

011.jpg014.jpg

015.jpg016.jpg

非特异性相互作用-维里系数

第二个维里系数(A2)用于量化蛋白质、聚合物和胶体的非特异性吸引和排斥相互作用。使用CALYPSO软件收集的单机光散射数据可以转化为Zimm形式、Debye形式进行分析。也可以确定更高的维里系数。

017.jpg 018.jpg

Time-Dependent MALS – 结合和解离动力学

一些蛋白质结合或解离反应可能需要几秒钟或几分钟才能完成。CALYPSO软件可以让你设定时间,让每一个成分在指定时间内达到平衡。在下面的例子中,不同浓度的小分子抑制剂被用来破坏蛋白质的二聚反应;光散射的减少对应于二聚体随着时间的推移分解成单体。

019.jpg

采集

光散射和浓度检测

实时显示光散射和浓度数据,并通过时间轴显示实验的精确程度,从而提供最大的实验多功能性。 在收集数据时进行分析,以监视和评估实验进度。 随时暂停和修改您的方法,以动态优化和更改参数,例如增加测量时间以适应较长的动力学。

1682675427277561.png

与ASTRA®同时收集

使用DAWN® 或 miniDAWN®进行的光散射数据以及来自示差折光检测器(例如Optilab®))或UV检测器的浓度数据可以与ASTRA同时收集。


灵活的浓度检测

使用UV或RI浓度检测器或基于计算稀释度的标称浓度。这些值将自动计算并与数据一起保存。采集后可轻松选择浓度检测模式。


仪器控制

Calypso 泵控制

CALYPSO软件允许您自定义CG-MALS实验的各个方面,从而使您可以完全控制交互系统。 打开脱气机电源,设置最大允许流量和压力,并执行灌注和清洗步骤,以准备进行实验的硬件。 可以将流量和洗涤参数编程为用于完整无人值守实验的实验方法。

1682675498619695.png


有用的配件

外部设备可以很容易地与Calypso集成在一起。 Calypso可以控制外部阀门以简化系统维护。 不使用时,请使用Orbit Solvent Recycler保持清洁的溶剂泵送通过系统。 实验后,使用外部二位阀在两个清洗缓冲液之间切换以进行彻底清洗。 两种功能都可以在一种方法中实现自动化,以快速轻松地进行清理。

方法设计

设计您自己的浓度梯度,或使用软件的内置方法之一来研究不同的大分子相互作用。 单个实验中可以运行任意数量的浓度梯度,重复运行可以保存到自己的数据文件中,并且系统可以从单个方法页面中选择清洗功能,准备好明天早上的下一次使用。 除了提供的示例方法外,还可以保存用户设计的方法供以后使用。


022.jpg 023.jpg


有用的工具

Simulations

无论您是已经进行实验还是想优化参数,还是想开始设计第一个 Calypso 实验,CALYPSO 软件都可以提供至关重要的模拟功能来帮助进行实验设计。输入参数,如分子量、维里系数、缔合化学计量比和平衡结合常数(KA),模拟工具存储了多达5个模型的预测光散射数据。此信息可用于确定实验所需的适当溶液浓度以及最佳成分梯度步骤。

024.jpg

Calculators

CALYPSO软件中包含计算器,以帮助进行实验设计和结果评估:使用A2计算器预测排除的体积A2并选择适当的浓度范围。 dn/dc计算器可帮助您估算折射率不同的缓冲液中分子dn/dc的变化。 KD计算器可计算一个或两个结合位点的平衡解离常数(KD),并有助于识别协同作用。

025.jpg






【技术特点对用户带来的好处】-- Calypso生物大分子相互作用分析仪


【典型应用举例】-- Calypso生物大分子相互作用分析仪


【产品所获奖项】-- Calypso生物大分子相互作用分析仪

客户评价

“来自辛勤工作的技术支持人员的非凡服务”
“使用 Calypso 进行装订研究易于设置,只需几个小时,并且易于解释。Wyatt的技术支持既深入又广泛。很少有地方能提供 Wyatt 提供的培训范围和质量。我使用 Calypso II 来测量蛋白质-蛋白质相互作用的化学计量和缔合常数。大多数结合方法的读数没有物理意义,例如结合曲线的最大振幅或斜率。另一个主要常见问题是描述数据的模型包含不可识别的参数。卡吕普索上的大多数实验都没有遇到同样的问题。通过光散射测定质量不受其他结合测定相同的关注点。1)质量是在校准仪器上计算的,其中可以测量影响光散射的所有其他参数。2)Calypso数据报告的结构在化学计量和Kd上都具有信息。 不再有斜坡或最大值!即使与“黄金标准”分析超速离心相比,Calypso(或成分梯度多角度光散射CG-MALS)也更胜一筹。我们发现,无论是使用平衡沉降还是速度沉降,蛋白质复合物的非 1:1 化学计量都很难用 AUC 数据进行分析。尽管我们得到了颗粒沉降速率的一致结果,但根据任何AUC数据计算质量可能会遇到可识别性问题。相比之下,CG-MALS的实验可以设计为直接探索在每个粒子的特定摩尔比下可以形成哪些化学计量。此外,所需的样品更少,时间也更少。我强烈建议使用 Wyatt 仪器进行颗粒表征。像马尔文这样的竞争对手还没有赶上,他们没有提供任何可以与Calypso II相媲美的仪器。Wyatt 提供无与伦比的服务,而不仅仅是购买仪器。十多年来,我们一直使用 Wyatt 仪器,而他们的出色支持却丝毫没有下降。 D. Brent Halling,德克萨斯大学奥斯汀分校


相关分子互作分析仪