技术指标:
此为恒流灌流。
温控范围:室温~100℃。
控温精度:±0.5℃。
水槽尺寸:390×330×180 mm。
灌流罐尺寸:200 mL/500 mL。
回流罐尺寸:100 mL/200 mL。
流量:0.02 ~ 380 mL/min。
转速范围:0.1~100 rpm(正反可调)。
转速分辨率:0.1 rpm。
蠕动泵尺寸:232×142×149 mm。
工作环境:温度0~40℃,相对湿度<80%。
防护等级:IP31。
Langendorff离体心脏灌流系统适用动物:小鼠,大鼠,豚鼠,兔子等。
实验动物 | 灌流速度 |
小鼠 | 2~4mL/min |
大鼠 | 8~10mL/min |
豚鼠 | 6~8mL/min |
兔子 | 30mL/min左右 |
······ | ······ |
实验步骤:
1、配制KH液(1 L):使用前,提前充氧(95% O2 +5% CO2 )饱和。取80 mL KH 液于-20℃预冷(取心脏时使用,冰水混合物最佳)。
试剂名称 | C(mM) | MW(g.mol-1) | g/L |
NaCl | 119 | 58.44 | 6.9544 |
NaHCO3 | 25 | 84.01 | 2.1003 |
KCl | 4 | 74.55 | 0.2982 |
KH2PO4 | 1.2 | 136.08 | 0.1633 |
MgCl2 | 1 | 95.2 | 0.0952 |
CaCl2 | 1.8 | 146.98 | 0.2646 |
D-glucose | 10 | 180.16 | 1.8016 |
2、实验准备:
(1)系统使用前的清洗:打开水浴锅,先用烧开的去离子水冲洗系统,再用未加热去离子水冲洗系统,使系统保持洁净,并调节到相应的灌流速度(注:大小鼠,豚鼠等选择相应的灌流速度。记录流速、泵速值和出液口流速值。记录三次取平均值。)水浴锅内的水需每两个月更换一次。
(2)给 KH 液充氧饱和。排出灌流系统内空气,使灌流液充满整个管路;
分别记录水浴锅、灌流罐KH液、出液口的温度(温度测三次取平均值,若有一次测量温度误差大于1℃,则弃之重测)以及周围环境的温度。(注:开始充氧到挂心脏 30~40 min)。
(3)打开循环水加热系统,调节循环水温度,使流出的循环水温度为 37 ℃(注:每次温度测定 3 遍,取平均温度,分别测量环境温度,水浴锅,灌流罐KH液和出液口的温度)。
3、配制所用药物:
给动物注射肝素钠(生理盐水配制终浓度 1000 U/ml):小鼠 100 U/20 g;豚鼠、大鼠 3125 U/kg。
4、灌流心脏:
将动物固定于实验平台,注射麻药,处死动物取其心脏,后将心脏主动脉连接到主动脉插管上,并用手术缝合线系紧。打开调试好的灌流系统开始灌流,进行后续实验。
5、仪器清洗:
实验完毕后,排干灌流系统内的KH液,并清洗管路。