骐骥生物
骐骥生物

  生理生化技术服务

  提供多种生理生化指标的测定,并包括取样的建议、提取、数据分析和作图等服务。

  我们目前提供如下50多种生理生化指标的测定:

  第一类:光合作用相关

  1. 叶绿素a,b,c;2. 类胡萝卜素;3. 叶绿素荧光;4. PEPC羧化酶(磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶);5. RubisCO(核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶)。

  第二类:抗氧化酶系统

  1. SOD(超氧化物歧化酶);2. POD(过氧化物酶);3. CAT(过氧化氢酶);4. APX(抗坏血酸过氧化物酶);5. GR(谷胱甘肽还原酶);6. DHAR(脱氢抗坏血酸还原酶);7. MDHAR(单脱氢抗坏血酸还原酶);8. 谷胱甘肽;9. 抗坏血酸;10. PPO(多酚氧化酶);11. IAAO(吲哚乙酸氧化酶)

  第三类:活性氧(ROS)

  1. H2O2(过氧化氢);2. O2-(超氧阴离子);3. 羟自由基。

  第四类:抗氧化能力指标

  1. 多酚;2. 黄酮;3. DPPH(二苯代苦味酞基自由基);4. 还原力;5. ABTS;6. FRAP。

  第五类:膜脂过氧化指标

  1. MDA(丙二醛)

  第六类:渗透调节物质

  1. 脯氨酸

  第七类:通用指标

  1. 根系活力;2. 可溶性蛋白;3. 可溶性糖;4. 纤维素;5. 半纤维素;6. 木质素;7. 蔗糖;8. 葡萄糖;9. 果糖;10. 电导率。

  第八类:营养和元素含量

  1. 离子含量(氮、磷、钾、钙、镁等);2. NR(硝酸还原酶);3. NiR(亚硝酸还原酶)。

      分子生物学

  质粒标准品构建服务

  对于进行绝对实时荧光定量PCR实验的研究人员来说,质粒的质量往往决定着实验的成败,因为需要质粒作为模板来制作标准曲线。

  标准曲线的制备是绝对荧光定量PCR实验的关键步骤,方法是先将测定基因的目的片段连接到载体中,然后转化大肠杆菌,获取阳性克隆,提取质粒,测定质粒浓度、计算其拷贝数。最后把质粒稀释成不同浓度的标准品,依据这一系列标准品进行荧光定量PCR,获得Ct值,然后拟合出标准曲线。

  测定样品时,标准品与未知样品同时进行PCR循环,根据未知样品的Ct值,结合标准曲线来求得未知样品cDNA的起始拷贝数。

  我们为您提供质粒标准品的构建服务,用于制作标准曲线,计算出基因的拷贝数。

  实验说明:

  1. 客户应提供获目的基因的序列。

  2. 客户应提供实验所需的原材料,如模板,引物,或者载体等。

  3. 客户若只提供组织或者细胞,我们则需要提取RNA或者DNA,扩增出目的条带后连接载体。

  4. 实验周期:1-2周。

  RNA提取

  RNA 提取与纯化技术是现代分子生物学技术的基础,cDNA文库构建、蛋白质体外翻译、RNA序列分析及Northern Blot等都需要一定纯度和完整性的RNA。完整性好和纯度高是评价RNA质量的两个关键标准。

  要获得完整的RNA取决于能否最低限度地避免纯化过程中内源及外源性RNase对RNA降解;要获得纯度高的RNA取决于能否有效去除RNA提取中DNA和蛋白质。

  骐骥公司技术人员经过多年的实验和研究,探索出了提取高质量RNA的方法,不仅可以提取易于获得RNA的动物细胞和组织的RNA,也可以经过短时间摸索提取复杂组织和样品中的RNA。这种经验和服务,将为您的下一步研究打下良好基础,也能加速您的实验进程。

  

  本公司近期完成的RNA提取电泳结果图。

  价格:

  1. 小于30样本:140元/样(一周内)

  2. 大于30样本:120元/样(一周以上)

  注:我们也可以进行转录组测序所需RNA的提取,进行过柱纯化,每个样品+30元。并可以做高质量的反转录,qPCR。

  样品要求:

  1. 新鲜组织或者细胞

  2. 液氮保存的细胞或者组织

  3. 液氮速冻后放入-70度冰箱中保存的组织或者细胞(3个月内)

  终产品:

  1. RNA样品。

  2. 实验报告,包括RNA浓度值、OD值和电泳照片。

  如下图所示:

  Figure1. 保存在离心管中的RNA。

  

  Figure2. 实验报告中的RNA浓度与OD值示例。

  

  基因克隆

  Western Blot

  提高蛋白质免疫印迹技术服务。

  多重PCR

  通过多年的实验和研究经验,为广大科研用户提供多重PCR的引物设计和多重PCR实验,用于多重基因和多重病原体以及微生物的快速检测。

  实时荧光定量PCR(Real time PCR)

  我们提供实时荧光定量PCR设计和服务,也提供从组织/细胞中的RNA提取、反转录和PCR以及检测一条完整的服务途径。

  在实验开展前,我们会和您沟通如何采样、保存和运输,设计出合理的PCR方案,优化实验体系,获得真实客观的数据。

  实验结束后,也协助您进行数据分析。我们有多年的研究经验,价格优惠合理,不仅做成熟的检测,也可以和您一起进行探索性的研究。

  因为实时荧光定量PCR具有很多优点,因此,被广泛用于基因表达分析,基因分型,转基因检测等研究和应用。

  实时荧光定量 PCR(Real time PCR) 是通过对 PCR 扩增反应中每一个循环产物的荧光信号进行实时检测,从而实现对起始模板定量及定性的分析。在实时荧光定量 PCR 反应中,引入了一种荧光化学物质,随着 PCR 反应的进行,PCR 反应产物不断累计,荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环,收集一个荧光强度信号,这样我们就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化,从而得到一条荧光扩增曲线。常规PCR 中,扩增产物(扩增子)是通过终点法来分析检测,即PCR 反应结束后,DNA 通过琼脂糖凝胶电泳,然后进行成像分析。而荧光定量PCR 可以在反应进行过程中进行累积扩增产物的分析和检测,即实现了“实时”。

  实验结束后,我们提供Ct值,扩增曲线,扩增效率,以及完整的实验报告,包括实验方法和实验中涉及到的各种仪器和试剂。

  

  图注:不同样品的扩增曲线(使用Roche LightCycler 480完成的实验)。

  备注:

  1. 我们免费为您进行内参基因的定量。

  2. 可提供相对定量和绝对定量的标准曲线,也可以为您提供或者构建用于绝对定量的质粒标准品。

  3. 可提供溶解曲线。

  4. 我们主要使用Roche LightCycler 480,LineGene 9600的qPCR仪器进行实验,也可以根据实验选择ABI 7500,7900或者Qiagen Rotor Gene-Q。

  5. 实验设计完成后,我们可在1-2周完成实验(RNA没有问题的情况下)。

  普通PCR

  为用户提供普通PCR技术服务,量大优惠。

  DNA提取

  从细胞,组织中提取DNA,可用于后续的PCR、分子标记、文库构建等实验。

  价格:

  1. 小于30样本:90/样(一周)

  2. 大于30样本:70/样(两周)

  终产品:

  1. DNA样品。

  2. 实验报告,包括OD值和电泳图片。

  脂质组学(Lipidomics)

  脂质组学(Lipidomics)是代谢组学的一个重要分支,主要研究生物体内所有脂质分子的特性, 以及它们在蛋白质表达和基因调控过程中的作用的学科。脂质不仅是生物膜的骨架成分和能量贮存物质,越来越多的证据表明,脂质也参与细胞的许多重要功能。在医学方面,已证明人类许多重大疾病都与脂质代谢紊乱有关,如阿兹海默症、糖尿病以及一些传染病等。在植物中,已经发现脂质参与光合作用、气孔运动、信号转导、细胞分泌、小泡运输和细胞骨架重组等过程。因此,脂质组学能够从整体上大规模地认识脂质在生命过程中起到的作用,并可能发现新的标志物,为将来疾病的治愈或者植物的抗性研究提供新的思路。

  细胞中脂质分子大体可以分为3大类:

  1. 非极性脂质 (包括胆固醇、胆固醇酯和甘油三酯)

  2. 极性脂质(包括磷脂类、鞘脂类和糖脂类)

  3. 脂质代谢物(指脂质合成或水解过程中产生的物质)

  脂质可细分为8类:

  1. 脂肪酸类(fatty acids)

  2. 甘油脂类(glycerolipids)

  3. 甘油磷脂类(glycerophospholipids)

  4. 鞘脂类(sphingolipids)

  5 . 固醇脂类(sterol lipids)

  6. 孕烯醇酮脂类(prenol lipids)

  7. 糖脂类(saccharolipids)

  8. 多聚乙烯类(polyketides)

  脂质组学研究的技术主要包括脂质的提取、分离、分析鉴定以及相应的生物信息学技术。

  我们提供8类脂质的100个以上分子种类的定量分析,包括脂质提取,上机测定、解谱、数据分析和作图等完整的业务。

  注:以极性脂类为主。

  实验说明:

  1. 材料:干重20mg以上,鲜重0.5g以上。干样常温保存和邮寄,鲜样低温保存(-20度以下)和干冰邮寄。

  2. 实验流程和周期:

  以50个样品为例,2个月左右可完成所有过程。

  (1)实验准备和预实验:1周

  (2)提取和分离:1周

  (3)测定:1周

  (4)解谱:1周

  (5)分析和作图:1周

  3. 实验平台:

  UPLC MS/MS QTof

  详细情况和实验费用请来电咨询,根据实验我们会设计最经济的方案,提供最全面的服务。

  代谢组学服务

  代谢组学(metabolomics)是对生物体内所有代谢物进行定量分析,是关于生物体系内源代谢物质种类、数量及其变化规律的科学,研究生物整体、系统或器官的内源性代谢物质及其与内在或外在因素的互作,并寻找代谢物与生理病理变化的相对关系,是系统生物学的组成部分。

  代谢组学的研究对象大都是相对分子质量1000以内的小分子物质。先进分析检测技术液质和气质联用仪结合软件系统等计算分析方法是代谢组学研究的基本方法。

  代谢组学与转录组学和蛋白组学比较具有以下优点:

  (1) 易于检测:代谢组学放大了基因和蛋白表达的微小变化,从而使检测更容易。

  (2) 有数据库:代谢组学的研究不需建立全基因组测序及大量表达序列标签(EST)或者全基因组的数据库,目前有相当多的化合物库可以使用。

  (3) 通用性强:由于给定的代谢产物在每个组织中都是一样的,所以研究中采用的技术更为通用,也更易被人们所接受。

  (4) 结果直接:代谢物可反映生物系统的生理和病理状态,可以区分同种不同个体之间的表型差异等。

  (5) 数据准确:使用高分辨质谱得到的数据准确,可重复性好。

  我们提供的代谢组学服务,材料不限,动植物、微生物、土壤等均可以。采用国际上通用的提取方法,使用高分辨液质联用仪检测,最后使用Progenesis QI软件进行鉴定和分析。快速得到最终结果。

  科研服务

  设计实验、产生数据、协助发表

  我们为您提供新思维、新思路,与您碰撞出新的火花。

  基于生理生化和分子生物学等技术服务,我们和您一起讨论,产生新的思路,发现新的问题,进而为您设计合理而严格的实验方案,保障得到的数据有用武之地。

  在我们这里得到实验数据后,我们根据实验背景、研究思路和实验方案为您进行数据分析和作图服务,使您的结果更上层楼!

  项目服务

  项目和课题整体服务

  对项目和课题进行分析,快速制定研究方案,进行整体服务。

  应用服务

  提供应用性服务。

  检测食品安全、环境病原微生物和鉴定转基因材料等,提供科学检测报告。

  个性化服务

  我们根据您自己的研究和应用需要,结合我们的研究平台和专业知识,为您提供个性化的服务,制定研究方案或者检测方案,得到与众不同研究设计或者检测方法,获取新颖的结果。