泵、混合器以及阻尼器对基线噪音的影响

泵、混合器以及阻尼器对基线噪音的影响

一般地，液相色谱仪配置高压二元泵或者低压四元泵，而泵的冲程体积以及混合器(二元高压泵)的体积大小，均会对色谱基线噪音水平产生影响，特别是在梯度洗脱的时候。一般地，泵的冲程体积越小以及混合器的体积相对越大，由输液造成的脉冲相对越小，对于梯度变化的响应能力越高，基线越平缓，如下图4所示。

此外，在应用二元泵的时，需要注意的一点是，当二元混合中的其中一元流动相的比例小于5%的时候，特别是在使用正相等度洗脱对一些医药中间体及终产品进行手性拆分的时候，最好使用单泵预混合的方式(下图5A)。避免由于泵在低比例时泵液精度相对较差，而导致色谱基线出现冲程相关峰，如下图5B所示。

由于泵发生故障而引起色谱基线噪音比较大的情况，归结起来主要有泵密封垫圈磨损，引起轻微的漏液以及泵内进入了气泡等；柱塞杆磨损或损坏导致的泵液不准；单向阀磨损或者轻微漏液。以上几种情况均会引起色谱基线发生大的波动，对分析方法产生影响。

如泵单向阀轻微漏液或者有气泡进入泵内，色谱基线均有可能出现Cycle型的波动，柱前压亦会出现相应的波动，此时可以通过减小流速或增大流速，观察频率是否会随着流速的改变而改变，以确认是否是由泵的原因引起的。

此外，流动相中的气泡会最终在检测器处被检测到，一般其更加类似于一个色谱峰，呈现正峰或倒峰，一般会伴随有前沿或者拖尾现象。此时可通过停泵，观察基线是否连续稳定，判断基线的波动是否由于气泡导致的。

当流动相由色谱柱流出并进入流通池的时候，两部分的温度差以及流通池内的温度的变化，也会使色谱基线的噪音水平增加，可参照前期内容进行理解。