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凝胶色谱的基本原理

2018.7.25
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JACS

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凝胶色谱的基本原理


以凝胶为固定相的色谱,称为凝胶色谱。葡聚糖凝胶的分离原理是葡聚糖凝胶在吸水后形成凝胶粒子,在其交联键的骨架中有许多一定大小的网眼。网眼大,大分子物质能进入网眼内;网眼小,只有小分子物质才能进入网眼;而超过一定限度的大分子物质,就被排阻在凝胶粒子的外部而不能进入网眼。这就使得能进入凝胶内部与不能进入凝胶内部的分子,如同按照分子大小过筛一样,所以称为分子筛。操作时首先将凝胶在适宜的溶剂中浸泡,使其充分膨胀,然后再铺成薄层,加入样品后,再以同一溶剂洗脱,则样品中大分子化合物不能进入凝胶颗粒内部,只在凝胶颗粒间移动,因此阻力小,行动快,走在前面;而小分子化合物能自由扩散进入到凝胶内部,因此在色谱时受到的阻力较大,行动慢,走在后面。如此经过一段时间的洗脱,混合物中各组分就会按照分子的大小而获得分离。


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