试剂空白:
由于生化测试测量的均为相对吸光度,所以从理论上说所有终点法的测试都需要把试剂本身的吸光度扣除。试剂本身的吸光度就是试剂空白。测量方法是按照正常测试的试剂和样本量,把样本换成蒸馏水来测量。
样本空白:
由于溶血、脂血、黄疸等情况,会导致样本本身的吸光度对测试结果造成影响。所以对样本本身吸光度的测量,即样本空白,可以去除这方面的影响测量方法是按照正常测试的试剂和样本量,把试剂换成蒸馏水或生理盐水来进行测量。
水空白:
比色杯在加入水以后的吸光度。也叫本底。
样本:
生化测试的样本包括血清、血浆、尿液、脑脊液等体液,最常用的是血清。血清的制备是在采血后加入凝固剂或者在水浴箱中水浴,促使血液凝固然后在离心机离心血细胞和血浆沉在试管下部,上面的血清就是生化测试中所需的样本血清。注意纤维蛋白可能漂浮在血清当中,在制备样本的过程中要挑出。
质控物质:
人工混合血清或动物血清,有定值、未定值两种,用于室内和室间质控。检验科通过每日的质控测试,监控测试的可靠性。
线性:
指反应时间段内反应曲线的线性程度。仪器自动计算测定时间段内的线性度,与线性限比较,如果大于该限,在结果上给予相应的标记,并自动查找反应线性区间。如果最后满足线性要求的测定点小于3 个,则不予计算结果,并标记出“无线性反应区间”。设定合理的线性限可以保证测定结果的准确度,计算公式如下:
(1)测定点大于9
线性度=(前6 个点吸光度的变化率-后6 个点的吸光度变化率)/所有点的吸光度变化率
(2)4≤测定点≤8
线性度=(前3 个点吸光度的变化率-后3 个点的吸光度变化率)/所有点的吸光度变化率
(3)当测定点数≤3、吸光度变化率小于0.006/分或吸光度变化率的差值小于0.006/分时不计算线性度
底物耗尽:
仅对动力学法有效,一些高浓度(活性)样品使底物耗尽,使反应不再为0 级(零级动力学法)或1 级(固定时间法)反应,为能正确反映测定结果,需设置底物耗尽限(某一特定吸光度),该吸光度限应正好是反应曲线中线性区与非线性区
(零级动力学法)或1 级反应区与多级反应区(固定时间法)的临界点,是在反应时间内反应没有发生底物耗尽时所能达到的最小(反应曲线向下)或最大(反应曲线向上)的吸光度值。
某一项目的底物耗尽限与所用试剂盒密切相关,就某一特定试剂盒来说,底物耗尽限应由用户预先用一系列已知浓度(或活性)的样本来确定:观察这些样本的实时反应曲线找出反应曲线上反应时间内线性区与非线性区的交叉点的吸光度,该吸光度就是该项目的底物耗尽限。更换试剂后需用同样的方法重新确定。