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酶标仪知识全科

2018.8.12
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韩金龙

致力于为分析测试行业奉献终身

酶标仪深受实验人员的喜欢,实际上就是一台变相的专用光电比色计或分光光度计。

一、酶标仪原理

酶标仪的基本工作原理与主要结构和光电比色计基本相同,光源灯发出的光波经过滤光片或单色器变成一束单色光,进入塑料微孔极中的待测标本。该单色光一部分被标本吸收,另一部分则透过标本照射到光电检测器上,光电检测器将这一待测标本不同而强弱不同的光信号转换成相应的电信号。电信号经前置放大器放大,模数转换等信号处理后送入微处理器进行数据处理和计算,最后由显示器和打印机显示结果。

二、酶标仪分类

酶标仪的分类根据通道分:可分为单通道酶标仪和多通道酶标仪,单通道酶标仪又有自动酶标仪和手动酶标仪之分。

根据波长分:滤光片酶标仪和连续波长酶标仪。

根据功能分:带紫外功能的酶标仪, 带荧光功能的酶标仪

三、酶标仪结构

规格有40孔板,55孔板,96孔板等多种,不同的仪器选用不同规格的孔板,对其可进行一孔一孔地检测或一排一排地检测。酶标仪所用的单色光既可通过相干滤光片来获得,也可用分光光度计相同的单色器来得到。在使用滤光片作滤波装置时与普通比色计一样滤光片即可放在微孔板的前面也可放在微孔板的后面其效果是相同的。

四、酶标仪特点

不同型号的酶标仪特点都不一样但是下面几点是所有国内市场上的酶标仪共有的特点。

大屏幕中文液晶显示,人机对话便捷、流畅。

菜单操作清晰简捷,用户选项及公式设置等内容全屏显示。

轻触式按键,易于掌握。

定性和定量处理系统功能全面,具备丰富的计算公式和曲线方程,并可自定义设置。

存储容量大,可储存多个检测程序和检测结果,设置简单,调用方便。

多孔道光纤量系统。

具有自动进行自检和校准。

全屏即时显示测量结果,无需打印,一目了然,实现即时观察。

五、酶标仪的操作步骤

1. 开启仪器电源开关,预热5分钟,同时启动电脑。

2. 启动Magellan.exe程序,加入程序主界面,仪器微孔板架同时自动打开。

3. 将待测微孔板在板架上放好。

4. 根据不同的测量要求,设置好测定波长和测量模式后,进行检测。

5. 保存检测结果或进行打印。

6. 关闭计算机和主机电源,登记使用记录。

六、酶标仪的使用条件

1) 仪器应放置在低于40分贝的环境下。

2) 为延缓光学部件的老化,应避免阳光直射。

3) 操作时环境温度应在15℃-40℃之间,环境湿度在15%-85%之间。

4) 操作电压应保持稳定。

5) 操作环境空气清洁,避免水汽,烟尘。

6) 保持干燥、干净、水平的工作台面,以及足够的操作空间。

七、酶标仪的应用

广泛用于各大医院、高校科研机构、疾病控制中心、技术质量监督局、动植物检验检疫和食品饲料行业等还有开展血液学、免疫学、肿瘤免疫学、传染病免疫学、TORCH感染免疫学、基因检验项目外,还可以对食品安全、农药残留、兽药残留、渔药残留等所有采用酶联免疫吸附试验进行的项目检验等。

八、酶标仪和光电比色计的差异

酶标仪盛装待测比色液的容器不再使用比色皿,而是使用塑料微孔板,微孔板常用透明的。

聚乙烯材料制成,对抗原抗体有较强的吸附作用。

酶标仪的光束都是垂直通过待测溶液和微孔板的,光束既可是从上到下也可以是从下到上穿过比色液。

酶标仪通常不仅用A,有时也使用光密度OD来表示吸光度.

九、酶标仪选购时考虑事项

第一酶标仪体积不宜太大

检验室空间有限,仪器体积太大会占据很多空间,给其他工作带来不便。在检验过程中,经常会有样品液体外溅,所以酶标仪外壳要易于消毒、清洁。

第二,仪器操作要简便

尽管目前检验人员的素质有限大幅度提高,懂英语的人也为数不少,但看中文毕竟比看英文方便、明确。

第三,可容纳更多的信息

检验中的原始记录即成为判定的依据。在临床检验中,酶标仪比色后的打印记录是最原始的记录之一,这份打印记录要能显示足够的信息量。

第四,对比色和打印的要求

一台好的酷标仪能够快捷地进行比色和打印,不仅为检测人员节省了大量的时间,而且确保了检验结果的准确性。

第五,优质的售后服务

酶标仪在临床上使用频率较高,一些部件的损坏率也较高,如放酶标仪的卡夹、滑槽等。厂商能及时地配置易置易损部件,对保证酶标仪正常运行和延长期寿命是非常重要的。

酶标仪需要日常维护和保养,要保证其始终获得准确的检测结果,还应定期进行校正。这要求厂商能提供优质的售后服务,解除用户的后顾之优。

九、酶标仪主要参数

酶标仪的稳定性(漂移)

选用492nm波长,在吸光度o.0A处,测定标称值为1.0A的光谱中性滤光片(测定操作按仪器说明进行),记录仪器示值或均值,10min后再次记录仪器示值或均值,前后两次测定值之差不应超过±0.005A。

吸光度测定的准确度

选用405,492和620nm波长,以空气为参比,分别测定标称值为0.5和1.0A的光谱中性玻璃滤光片,用专用测试板代替酶标板,按仪器说明连续测定3次,按下式计算准确度:AA=1/3(A、+A。+A3)—A:(A:为标准值)。

吸光度测定的重复性

酶标仪的线性选用540nm波长,将标称值o.5,1.0A中性滤光片分别放入专用测试板样本位置中,以空气为参比,各重复测定3次;然后将以上两片中性滤光片叠加后置于专用测试板的同一孔位中,重复测定3次。

测定速度

选用492nm波长,放人96孔酶标板进行测定,用秒表计测仪器打印出全部数据的时间。

十、酶标仪在使用时常见故障

故障一:测量的结果重现性不好,即使用空板测量误差也在允许的范围之外。

故障分析:检查试剂发现没有问题然后检查判定公式也没有问题最后检查光路有无污染。

故障二:测量结果OD值偏低。 

故障分析:排除完灯的能量值偏低后,检查发现滤光片上有灰尘,用蒸馏水和擦镜纸擦洗干净晾干后故障排除。



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