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RT-PCR 与WB结果的变化趋势相反

2019.3.02
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zhaochenxu

致力于为分析测试行业奉献终身

RT-PCR 与WB结果的变化趋势并不总是一致的,可以从以下几个方面来解释:
1、基因的表达分为转录和翻译两个层面,即mRNA水平和蛋白水平。而真核基因表达的转录和翻译发生的时间和位点存在时空间隔;
2、在转录后,又会有转录后加工,转录产物的降解,翻译,翻译后加工及修饰好几个层面。所以转录水平和翻译水平并不完全一致,且这种调节在不同蛋白质之间存在差异;
3、mRNA与蛋白质的半衰期不同,mRNA极易降解,在组织内存在时间较短,而翻译成蛋白质后性质较稳定;
4、正常状态下,细胞内可能存在一定量的蛋白质储备,不行使功能,而这种储备量的多少在不同组织有所不同;
5、与检测方法有关,RT-PCR检测mRNA的灵敏度非常高,理论上只要有一个拷贝的目的基因即可检测;
6、蛋白质是行使功能的基本单位,所以归根结底要落实到蛋白水平究竟怎么变化,从而判断其对相应功能的影响。

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