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PCR仪梯度与普通区别

2019.3.02
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zhaochenxu

致力于为分析测试行业奉献终身

1、梯度pcr仪就是可以允许用户在退火步骤时选择同时进行不同的退火温度以筛选zui佳退火温度。以wealtec的SEDI G为例,96孔控温模块按照8x12排布,解链步骤设置完后,设置退火步骤时,可以选择“梯度步骤”,此时程序会允许你设置梯度温控范围,让12个纵列孔位在此步骤时以不同温度运行。之所以pcr仪有这种功能有两个原因:1.我们本来就不知道哪个退火温度zui好 2.同一品牌同一型号的不同pcr仪之间温控也有误差,一个pcr仪上的退火温度用到另一个上面效果就又变了,也需要筛选。

 

2、梯度PCR可以让不同的孔有不同温度,比如横向有12个孔。退火温度可以从低到高。

普通PCR的孔所有温度是一样的。

 

3、梯度PCR仪是由普通PCR仪衍生出的带梯度PCR功能的基因扩增仪。PCR反应能否成功,退火温度是关键,梯度PCR仪每个孔的温度可以在指定范围内按照梯度设置,根据结果,一步就可以摸索出zui适反应条件。一次性PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件(通常12种温度梯度)的称之为梯度PCR仪。因为被扩增的不同的DNA片段其zui适合的退火温度不同,通过设置一系列的梯度退火温度进行扩增,从而一次性PCR扩增就可以筛选出表达量高的zui适合退火温度进行有效的扩增。主要用于研究未知DNA退火温度的扩增,这样可节省试验时间、提高实验效率,又节约实验成本。在不设置梯度的情况下亦可当做普通的PCR用。梯度PCR仪多应用于科研、教学机构。

 

4、适用于

PCR仪适用于分子生物学、医学、食品工业、司法科学、生物技术、环境科学、微生物学、临床诊断、流行病学、遗传学、基因芯片、基因检测、基因克隆、基因表达等领域以聚合酶链式反应(Picymerase Chain Reaction , PCR)为特征的、以检测DNA/RNA为目的的各种病原体检测及基因分析。


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