分析测试百科网

搜索

喜欢作者

微信支付微信支付
×

PCR常见术语

2019.3.02
头像

zhaochenxu

致力于为分析测试行业奉献终身

PCR常见术语

1.矩阵形式代表什么?

矩阵形式就是体外包装的cDNA文库以二维矩阵的形式进行排列组合,用于筛选特定的基因和片段。

2.SM是什么意思?

SM是“悬浮培养液”的缩写。

3.Ct 值的定义

在荧光定量PCR技术中,有一个很重要的概念 -- Ct值。C代表Cycle,t代表threshold,Ct值的含义是:每个反应管内的荧光信号到达设定的域值时所经历的循环数

4.什么是内参照法?

在不同的PCR反应管中加入已定量的内标和引物,内标用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记,下游引物不标记。在模板扩增的同时,内标也被扩增。在PCR产物中,由于内标与靶模板的长度不同,二者的扩增产物可用电泳或高效液相分离开来,分别测定其荧光强度,以内标为对照定量待检测模板。   

5.PCR-ELISA法:利用地高辛或生物素等标记引物,扩增产物被固相板上特异的探针所结合,再加入抗地高辛或生物素酶标抗体-辣根过氧化物酶结合物,zui终酶使底物显色。常规的PCR-ELISA法只是定性实验,若加入内标,作出标准曲线,也可实现定量检测目的。
 

6. 什么是竞争法?

选择由突变克隆产生的含有一个新内切位点的外源竞争性模板。在同一反应管中,待测样品与竞争模板用同一对引物同时扩增(其中一个引物为荧光标记)。扩增后用内切酶消化PCR产物,竞争性模板的产物被酶解为两个片段,而待测模板不被酶切,可通过电泳或高效液相将两种产物分开,分别测定荧光强度,根据已知模板推测未知模板的起始拷贝数。   


pcr
互联网
仪器推荐
文章推荐