牛津纳米孔测序仪在美国人类遗传学学会年会上公布技术参数
2014年的ASHG年会于10月18日开始在圣地亚哥举行，有幸亲眼目睹了牛津纳米孔公司MinIon的现场演示，技术之创新，令人震惊!21日下午，牛津纳米孔公司特地在旁边的Hardrockho举行了一个小型的封闭式的技术说明会，讲解了纳米孔的测试结果。
尺寸
MinION的尺寸之小，大大出乎我的意料，竟然只有一支笔的长度，重大约100克，太神奇了。要知道，无论是Illumina,Pacbio，还是IonProton都是100斤以上大家伙。MinION完全颠覆了测序仪的形象，从*眼看到MinION，我就觉得纳米孔技术称之为第四代基因测序仪，丝毫不为过。MinION直接通过USB链接到笔记本上，原始的电流信号通过网络传到英国的服务器上，进行Basecalling。
测序长度
纳米孔测序没有测序长度的说法，因为它完全颠覆了测序读长的定义。事实上，它总是能够完整的把一条DNA链从头测到尾，因此它的测序读长就是DNA的长度。极端的情况是，一整条染色体都可以从头测完，但是一般来说样本制备时DNA会断开。根据UCSC报道的用户使用的结果表面，一般读出的reads平均为1kb-5kb，这个读长完全是因为样本打断到了这个尺寸。我看到zui长的reads竟然长达120kb，太神奇了!
测序速度
一个MinION有500个纳米孔在并行测序，每个孔每秒测30bp，因此，要测到1G的数据，需要3天时间。
测序错误率
纳米孔测序错误率非常高，高到现有的sequencealignment软件都无法应对。UCSC的生物信息学专家测试了BWA,Bowtie等等，每一种都不太适合。而测序错误率也因软件不同而相差巨大，如果一定要给个数字的话，大约为30%的错误率。纳米孔技术无法像pacbio一样做环形测序，纳米孔公司的人也承认没有找到大幅度降低错误率的办法。
样本制备
样本的制备有点让人失望。原本吹嘘说是只要DNA提取出来就可以直接上机测序的，而事实上需要四步，zui短要90分钟。分别为打断，末端修复，ATailing和加接头。这样做的主要目的是降低DNA穿过纳米孔的速度。
应用
纳米孔测序zui大zui有优势的应用是什么?纳米孔的CEO似乎也没有想清楚。
首先，英国一所大学介绍了使用MinION的快速测序，能够在二十分钟内检测出沙门氏菌。在传染病快速检测方面有明显优势。
其次：在人基因组复杂的区间，比如HLA，纳米孔的超长读长有很好的应用。
第三：纳米孔的长片段测序和Illumina短序列测序相结合，方便基因组组装。
但是，纳米孔测序不适合做无创产前诊断，肿瘤基因突变，也不适合做新生儿遗传性疾病筛查。
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