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DNA的酶切与连接——DNA片段连接

2019.3.25
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zhaochenxu

致力于为分析测试行业奉献终身
实验方法原理核酸片段可以通过连接酶的作用连接起来而获得重组分子。
实验材料

λDNA EcoT14I：由11条DNA片段组成

试剂、试剂盒

T4 DNA连接酶及其配套的10×连接缓冲液 0.5×TBE电泳缓冲液 6×Loading Buffer Goldview 琼脂糖

仪器、耗材

电泳仪 水浴锅 移液器 微波炉 成像设备

实验步骤

1.取200ul离心管按下表加入试剂。

2.混匀后点动离心，将溶液甩至管底。
3.置于已调好温度为12℃-14℃水浴锅（或PCR仪）中。
4.保温2h后取出。
5.电泳检测。

λ/EcoT14 I 样品 10ul（兼作 DNA Marker）+ 10X的loading buffer

DNA连接样品：10 ul + 10X的loading buffer 2 ul
6.DNA连接片段的电泳预期结果。


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