| 实验方法原理 | 胞质提取物中的微管蛋白和微管结合蛋白（MAP)，可以通过37℃孵育，然后用镁沉淀的方法与其他的胞质成分分离 |
|---|---|
| 实验步骤 | ① 加入0.1mol/L MgCl2，将一管毛地黄皂苷/EDTA提取物（主方案中的CYTO组分）的Mg2+含量调至7〜35mmol/L。37℃孵育样品20〜30min。所使用的毛地黄皂苷/EDTA提取物的体积取决于实验目的。镁的终浓度取决于最初材料的来源。通常，35mmol/L的镁是过多的，多用于以完全回收蛋白为目的的实验。 ②离心8min沉淀微管蛋白和微管结合蛋白。 ③转移上清液至一干净的小管中。用咪唑缓冲液（pH7.5)或其他合适的缓冲液洗沉淀，并用细胞骨架溶解缓冲液重悬沉淀，然后测定蛋白浓度和进行电泳分析。 展开 |
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