方案5 细菌中重组蛋白的小量提取实验
| 实验方法原理 | 利用细菌获得用于纯化的重组蛋白是非常方便的。为了检测诱导和重组蛋白的表达水平，评估方法的快速简单是很重要的。本方案使用 0.5% TritonX-1OO 裂解细胞，小量制备细菌提取物。 |
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| 实验材料 | |
| 试剂、试剂盒 | |
| 仪器、耗材 | |
| 实验步骤 | 1.室温离心 1min，从 1ml 培养物中收集细菌。 2.去除上清，用 1ml 预冷的 0.5%(体积分数）TritonX-100 重悬细菌细胞的沉淀物。 3.超声波处理悬浮液，3 个循环，每次 20s。超声间隙把细胞放在冰上冷却。 4.将悬浮液在小型离心机中离心 lmin。 5.在上清液中加入 Lammli 样品缓冲液（含有 100 mmol/L DTT)。混合物煮沸 2 min，用分析级 SDS-PAGE 分析目的蛋白（见方案 1) 展开 |
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