实验方法原理 | 用抗体筛选λgt11 cDNA文库时,可待噬斑长到一定裎度方可诱导表达融合蛋白,筛选到阳性克隆的成功概率就可能大大增加。噬菌体生长3~4 h 后,将含诱导剂IPTG的滤膜放入噬斑平板,即可诱导β-半乳糖苷酶-cDNA融合蛋白的表达,继续在37℃培养,然后按基本方案用抗体对影印滤膜进行筛选。 |
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实验材料 | |
试剂、试剂盒 | |
仪器、耗材 | |
实验步骤 | 1. 用1×104~5×104融合有cDNA的λ噬菌体感染0.5~1.0 ml 过夜培养的Y1090新鲜菌悬液。
3. 将132 mm 直径的硝酸纤维素滤膜故入10 mmol/l IPTG溶液中浸泡后,取出干燥。 |