实验方法原理 | 该方案由方案 蛋白质的SDS-PAGE实验 中介绍的标准 SDS-PAGE 衍变而来。虽然在进行变性凝胶电泳时多选用 SDS-PAGE, 但阴禽子去污剂 SDS 仍然存在一些局限。例如,SDS 在低温下会结晶,某些情况下还会使蛋白质聚集或沉淀,而且有些蛋白在 SDS 凝胶中不能很好地溶解或者出现异常的迁移现象。这些情况下,可选择采用阳离子去垢剂进行 PAGE。这里讲到的不连续、阳离子去垢剂 PAGE 方法参照了 Atkins 等(1992)。这个系统中使用的是阳离子去垢剂 CTAB(十六烷基三甲基溴化铵),其浓缩胶以两性离子精氨酸(作为浓缩溶液)和 tricine[N-三(羟甲基)甲基甘氨酸] 为缓冲体系。如果样品没有经过煮沸和外加还原剂,一些由 CTAB 电泳系统分离的蛋白质仍保持其酶学活性。 |
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实验材料 | |
试剂、试剂盒 | |
仪器、耗材 | |
实验步骤 | 1.按照 蛋白质的SDS-PAGE实验 制备凝胶,但浓缩胶和分离胶用本文配方。 |