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离子交换高效液相层析实验_阳离子交换HPLC

2019.3.29
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zhaochenxu

致力于为分析测试行业奉献终身
实验材料

蛋白质

试剂、试剂盒

磷酸钠NaCl

仪器、耗材

层析柱HPLC进样器

实验步骤

1.  用10倍柱床的已脱气的水冼去柱子的贮存溶剂，并以10倍体积的高盐缓冲液在低pH洗硅胶类或聚合体IEX柱。

2.  如按前述阴离子方案分离，那么应用磷酸钠和磷酸钠/NaCl缓冲液分离蛋白标准，采用以下液体进行梯度洗脱：20 min 以上的0%~80%磷酸钠/NaCl缓冲液线性梯度或用复含梯度：0 min 时10%磷酸钠/NaCl，15 min 时60%，20 min 时80%，并保持5 min，然后在10 min 以上的时间回复到10%外，在进行下次层析前，保持10%缓冲液15 min。


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