组织的分离实验_离心分离法

2019.3.31

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实验方法原理	如培养物为血液、羊水、腹水和胸水等细胞悬液时，可采用离心法分离。一般用低速500~1000 转/分速度，离心5~10 分钟即可。如悬液量大，离心时间可适当延长，但如离心速度过大和时间太长，易压挤细胞使之受损或死亡。微量全血法淋巴细胞培养时，可不必进行淋巴细胞分离，可采用全血培养法。在需用大量白细胞进行培养情况下，才应采用特殊分离技术如使用分层液等方法。
实验材料	抗凝血
试剂、试剂盒	BSS
仪器、耗材	离心机
实验步骤	国产淋巴细胞分层液（Lyphocyte Separation Medium）效果很好。分层液是根据细胞比重不同，使各类细胞相互分开的。红细胞比重1.092，淋巴细胞和大单核等白细胞比重为1.070；分层液适用于分离血中淋巴细胞。 1. 取抗凝血若干毫升； 2. 按1：1 加入无菌分层液（滤过除菌）后，800—1000 转离心； 3. 无菌分离出白细胞（白细胞位于红细胞上层，呈微白色）； 4. BSS 漂洗1—2 次，可用于培养或其它实验。展开
注意事项	1. 如用动物皿（如小鼠），白细胞的比重与人不同；小鼠白细胞比重为1.080左右，需用相应比重的分层液。

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