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细胞凝集反应与细胞膜的渗透性

2019.4.11
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zhaochenxu

致力于为分析测试行业奉献终身

细胞膜是由脂类双分子层镶嵌蛋白质构成的单位膜,而脂类和蛋白质又与糖分子结合为细胞表面的分枝状糖外被。凝集素是一类可逆结合特异糖基的蛋白质,具有使细胞凝集、血型鉴定、促进淋巴细胞分裂、防害抗虫等作用。凝集素使细胞凝集是由于它与细胞外被的寡糖链相连接,起到“桥”的作用。

实验材料

土豆块茎

试剂、试剂盒

鸭血红细胞PBS缓冲液土豆氯化钠乙醇

仪器、耗材

显微镜天平载玻片滴管离心管烧杯移液管试管试管架

实验步骤

一、细胞凝集反应

 

1.  2%鸭血红细胞悬液制备:新鲜鸭血加acd抗凝剂,生理盐水洗5次,每次2 000 r/min,离心5 min,按红细胞压积用生理盐水配成2%鸭血红细胞悬液。

 

2.  土豆凝集素制备:土豆2克,加10 ml PBS缓冲液,浸泡2 h。

 

3.  细胞凝集反应

土豆凝集素 1滴

2%鸭血红细胞液  1滴

载玻片上混匀,静置20 min,镜检


4.  对照

PBS 1滴

2%鸭血红细胞液 1滴


二、细胞膜的渗透性


1.  低渗溶液

试管一支:

鸭血红细胞液1ml

ddh2o 10ml

轻摇混匀,观察颜色变化,若有溶血,记下自加入鸭血到溶液透明澄清的时间(注意结合镜检)。


2.  等渗溶液

0.17 mol/l 氯化钠、0.17 mol/l 氯化铵、0.17 mol/l 醋酸铵、0.17 mol/l 硝酸铵、0.12 mol/l 草酸铵、0.12 mol/l 硫酸铵、0.32 mol/l 葡萄糖、0.32 mol/l 甘油、0.32 mol/l 乙醇、0.32 mol/l 丙酮等8种溶液进行同样实验,步骤同上。

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