冷溶血试验

2019.4.13

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实验方法原理	阵发性寒冷性血红蛋白尿症（PCH）是一种自身免疫性溶血综合征患者体内产生一种冷反应性抗体（D－L抗体），这种抗体是一种IgG，在37℃下与红细胞不能牢固结合，当温度低至20℃以下时，如有补体存在D-L抗体便能结合于红细胞表面，当温度再增高至37℃时，由于一系列补体参与反应使红细胞膜上形成空洞，发生溶血．
实验材料	豚鼠
试剂、试剂盒	生理盐水
仪器、耗材	离心机
实验步骤	一、实验试剂：补体制备：抽取豚鼠心脏血液2－4ml．分离其血清，保存于冰箱．临用时以生理盐水作1：10稀释．二、实验操作： 1. 取用者及同型或O型正常人血各8ml，以玻璃珠去纤维蛋白的方法分别制备血清与红细胞悬液或者取其中6ml应不予抗凝，分高血清．余下的2ml抗凝，以分离红细胞． 2. 用生理盐水洗涤红细胞三次，最后制成50％红细胞悬液． 3. 按表l-3-7滴加各液，经培育后离心1000r/min，5min观察溶血现象。三、实验结果判断：若第1、第2管溶血，其余管不溶血为阳性展开
注意事项	操作中第1、第2管最好在20℃以下进行操作注：患者与正常人血清总量56℃灭能30min（第四号试管）展开

冷溶血试验

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