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冷溶血试验

2020.8.10
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

实验方法原理 阵发性寒冷性血红蛋白尿症(PCH)是一种自身免疫性溶血综合征患者体内产生一种冷反应性抗体(D-L抗体),这种抗体是一种IgG,在37℃下与红细胞不能牢固结合,当温度低至20℃以下时,如有补体存在D-L抗体便能结合于红细胞表面,当温度再增高至37℃时,由于一系列补体参与反应使红细胞膜上形成空洞,发生溶血.

实验材料 豚鼠

试剂、试剂盒 生理盐水

仪器、耗材 离心机

实验步骤

一、实验试剂:补体制备:抽取豚鼠心脏血液2-4ml.分离其血清,保存于冰箱.临用时以生理盐水作1:10稀释.


二、实验操作:


1. 取用者及同型或O型正常人血各8ml,以玻璃珠去纤维蛋白的方法分别制备血清与红细胞悬液或者取其中6ml应不予抗凝,分高血清.余下的2ml抗凝,以分离红细胞.


2. 用生理盐水洗涤红细胞三次,最后制成50%红细胞悬液.


3. 按表l-3-7滴加各液,经培育后离心1000r/min,5min观察溶血现象。


三、实验结果判断:若第1、第2管溶血,其余管不溶血为阳性

注意事项

操作中第1、第2管最好在20℃以下进行操作


注:患者与正常人血清总量56℃灭能30min(第四号试管)


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