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人流产胎儿成纤维细胞和包皮来源成纤维细胞的取材

2019.4.17
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184****5725

致力于为分析测试行业奉献终身

实验概要

人流产胎儿成纤维细胞(Human fetal fibroblast)和包皮来源成纤维细胞的取材

主要试剂

细胞基础培养液、DPBS、0.25%Trypsin

主要设备

35 mm培养皿、4孔培养板、滤器、2 mL、5 mL、10 mL、15 mL、25 mL、50 mL离心管,T25培养瓶、细胞计数仪、巴斯德管、倒置显微镜、培养箱、水浴锅、生物安全柜、体视镜

实验材料

流产胎儿皮肤、包皮(取自医院,需签知情同意书)

实验步骤

①取流产胎儿腹部皮肤或者包皮约3 cm2,置于盛放DPBS的35 mm培养皿中,剪碎成1 mm2
②收集组织块转移至15 mL离心管中,室温1000 r/min离心3 min。
③弃去上清,以细胞基础培养液重悬组织块,转移至T25培养瓶中,尽量使组织块均匀分布,同时小心吸去组织块周围的培养液。
④倒置培养瓶过夜,次日翻转,加入1.5 mL细胞基础培养液。
⑤隔日更换新鲜培养液,约7日可见组织块周围有细胞爬出
⑥0.25%Trypsin消化传代


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