实验概要
在体内磁转™是一种快速，简单和高效的方法，特别是在体内靶细胞/组织的转染。这个原系统与磁性纳米粒子和核酸载体相结合。靶向这种方式，最大限度地减少全身分布，降低基因载体的失活，并降低毒性。此外，磁场力，提高靶组织的磁性纳米粒子吸收，从而提高转染效率。这可以减少所需的处理时间，这是改善体内的核酸转染的关键。
主要试剂
体内PolyMag是一种阳离子聚合物为基础的配方磁性纳米粒子。它可以用来与任何核酸(质粒的DNA，反义寡核苷酸，基因的shRNA和siRNA)
体内DogtorMag是阳离子脂质体为基础制定的磁性纳米粒子。Dogtor，一个特定的阳离子脂质体，CombiMag磁性纳米粒子。这种试剂是适合任何核酸(质粒的DNA，反义寡核苷酸，mRNA，shRNA和siRNA)。
实验材料
小肿瘤淋巴结
卵巢
肾上腺
皮下肿瘤
唾液腺
脑
胰腺
脾
大的肿瘤
肌肉
外科手术设备
实验步骤
体内PolyMag：
DNA，在体内PolyMag和盐溶液，应在室温。我们建议使用1微升PolyMag每微克DNA。
1．试剂的准备。
1) 体内PolyMag。每次使用前，旋涡PolyMag，加入所需体积的PolyMag(根据DNA的所需)至无菌微管。
注：小于1微克剂量的DNA用前用去离子水稀释，根据需要取所需体积。用剩的稀释后的PolyMag应弃掉。
2) DNA溶液。在无菌小瓶内稀释DNA(减去在体内PolyMag的体积)。
注：最终的DNA的浓度不得超过0.5 mg/mL。
2．复合物的形成。向PolyMag内加入DNA溶液立即上下摇动试管将其混合。将混合物在室温孵育20分钟。
3．注射。
1) 将磁铁置于目标组织上
2) 慢慢的将混合物注入
3) 让磁铁竖立从5分钟到1小时
注：置于磁铁几秒钟后，注射复合物于侧脑室或肿瘤内。添加染料如Fast Green FCF可以为更好地监测注射复合体。
4．在适当的时间点监测基因的表达。
重要事项：
1) 每头动物注射体内PolyMag不要超过1 mL。
2) 如果复合物已形成沉淀，不要注入。
体内CombiMag：
DNA，Dogtor试剂和盐溶液，应该是在室温下。我们建议使用每微克DNA加入1μLDogtor和1微升CombiMag。
1．试剂的准备。
1) DNA溶液。用一半的注射量稀释DNA在无菌小瓶(减去体内CombiMag的量)
注DNA的最终浓度不得超过0.5 mg/mL。用缓冲液稀释DNA(HBS，PBS，生理盐水，林格氏液)或5％葡萄糖溶液。
2) Dogtor溶液。使用前，轻轻混匀试剂，用一半的注射量稀释稀释Dogtor，室温下孵育5分钟。
3) 在体内CombiMag试剂。每次使用前涡旋试剂，使用1μL CombiMag /μg DNA。将CombiMag试剂直接加入进入管(不用任何溶剂稀释)。
注：DNA体积小于1 µg，用前用去离子水稀释，根据需要取所需体积。用剩的稀释后的CombiMag应弃掉。
2．复合物的形成。DNA与Dogtor溶液的混合，轻轻混匀，在室温下孵育5分钟。再将混合物与CombiMag混合。轻轻混匀，室温孵育20分钟。
3．注射。
1) 将磁铁置于目标组织上
2) 慢慢的将混合物注入
3) 让磁铁竖立从5分钟到1小时
注：置于磁铁几秒钟后，注射复合物于侧脑室或肿瘤内。添加染料如Fast Green FCF可以为更好地监测注射复合体。
4．在适当的时间点监测基因的表达。
重要事项：
1) 每头动物注射体内CombiMag不要超过1 mL。
2) 如果复合物已形成沉淀，不要注入。
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