胞转染是指将外源分子如DNA，RNA等导入真核细胞的技术。常规转染技术可分为瞬时转染和稳定转染（永久转染）两大类。本实验室主要是质粒转染、miRcroRNA转染、慢病毒转染、药物转染、多肽转染等。
一. 实验材料及试剂
六孔板、CO2培养箱、EP管、酒精灯等；无血清培养基、MEM-α或DMEM、CO2培养箱、EP管、质粒、细胞等
二、实验内容
1当六孔板中细胞密度达90％时，准备转染，将无血清培养基、MEM-α或DMEM取出复温并注意平衡好（以六孔板为例，其他孔板都可以按照说明书进行）；
2取出细胞，将培养基换成无血清培养基，放回孵箱培养；
3取灭菌的EP管，按要求混好质粒（约4ug/孔），每管250uL DMEM，混匀；
4另取EP管，加入lipofectamine 2000（5 uL/孔）和MEM-α或DMEM（250uL/孔），轻轻混匀后室温静置5min；
5将上述两个EP管混匀；
6室温静置20min，将lipofectamine 2000-质粒混合液滴到六孔板中，500uL/孔；
7将细胞放回孵箱培养，4h后换回含血清的完全培养基。
三、注意事项
1、Lipofectamine 2000要求细胞铺板密度较高，以90%-95%为佳，这有助于减少阳离子脂质体细胞毒性造成的影响。
2、Lipofectamine 2000可用于有血清培养基的转染，并且转染前后不需要换培养基，使得操作方便了许多，但是要注意制备转染复合物时要求用无血清培养基稀释DNA和转染试剂，因为血清会影响复合物的形成。复合物形成后是可以加入血清。这里要特别注意检测所用的无血清培养基是否能和Lipofectamine 2000匹配，比如已知CD293, SFM II，VP-SFM就不行。
3、如果你研究的基因要求比较长的表达时间，比如细胞周期相关基因，或者时细胞表面蛋白，最好选择细胞铺板密较低的转染试剂，不适合用Lipofectamine 2000。
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