一、核酸及蛋白质常用数据
1．核苷三磷酸的物理常数
化合物 | 分子量 | λmax(pH7.0) | 1摩尔溶液（pH7.0）中λmax时的最大吸收值 | OD280/OD260 |
ATP | 507 | 259 | 15400 | 0.15 |
CTP | 483 | 271 | 9000 | 0.97 |
GTP | 523 | 253 | 13700 | 0.66 |
UTP | 484 | 262 | 10000 | 0.38 |
dATP | 494 | 259 | 15200 | 0.15 |
dCTP | 467 | 271 | 9300 | 0.98 |
dGTP | 507 | 253 | 13700 | 0.66 |
dTTP | 482 | 267 | 9600 | 0.71 |
2．常用核酸的长度与分子量
核酸 | 核苷酸数 | 分子量 |
λDNA | 48502（双链环状） | 3.0×107 |
pBR322 | 4363（双链） | 2.8×106 |
28SrRNA | 4800 | 1.6×106 |
23SrRNA | 3700 | 1.2×106 |
18SrRNA | 1900 | 6.1×105 |
19SrRNA | 1700 | 5.5×105 |
5SrRNA | 120 | 3.6×104 |
tRNA（大肠杆菌） | 75 | 2.5×104 |
3．常用核酸蛋白换算数据
（1）重量换算
1μg=10-6g 1pg=10-12g
1ng=10-9g 1fg=10-15g
（2）分光光度换算：
1A260双链DNA=50μg/ml
1A260单链DNA=30μg/ml
1A260单链RNA=40μg/ml
（3）DNA摩尔换算：
1μg 100bp DNA=1.52pmol=3.03pmol末端
1μg pBR322 DNA=0.36pmol
1pmol 1000bp DNA=0.66μg
1pmol pBR322=2.8μg
1kb双链DNA（钠盐）=6.6×105道尔顿
1kb单链DNA（钠盐）=3.3×105道尔顿
1kb单链RNA（钠盐）=3.4×105道尔顿
（4）蛋白摩尔换算：
100pmol分子量100，000蛋白质=10μg
100pmol分子量50，000蛋白质=5μg
100pmol分子量10，000蛋白质=1μg
氨基酸的平均分子量=126.7道尔顿
（5）蛋白质/DNA换算：
1kb DNA=333 个氨基酸编码容量=3.7×104MW蛋白质
10，000MW蛋白质=270bp DNA
30，000MW蛋白质=810bp DNA
50，000MW蛋白质=1.35kb
100，000MW蛋白质=2.7kb DNA
4．常用蛋白质分子量标准参照物
| （1）高分子量标准参照 | （2）中分子量标准参照 | （3）低分子量标准参照 | |||
| 肌球蛋白 | 分子量 | 磷酸化酶B | 97，400 | 碳酸酐酶 | 31，00 |
| 肌球蛋白 | 212，000 | 牛血清白蛋白 | 66，200 | 大豆脻蛋白酶 | 21，500 |
| β-半乳糖甘酶B | 116，000 | 谷氨酶脱氢酶 | 55，000 | 抑制剂 | |
| 磷酸化酶B | 97，400 | 卵白蛋白 | 42，700 | 马心肌球蛋白 | 16，900 |
| 牛血清白蛋白 | 66，200 | 醛缩酶 | 40，000 | 溶菌酶 | 14，400 |
| 过氧化氢酶` | 57，000 | 碳酸酐酶 | 31，000 | 肌球蛋白（F1） | 8，100 |
| 醛缩酶 | 40，000 | 大豆脻蛋白酶 | 21，500 | 肌球蛋白（F2） | 6，200 |
| 抑制剂 | 肌球蛋白（F3） | 2，500 | |||
| 溶菌酶 | 14，400 | ||||
5．常用DNA分子量标准参照物
λDNA/HindⅢ | λDNA/EcoRⅠ | λ/HindⅢ+EcoRⅠ | pBR322/HaeⅢ | |
23130 | 21226 | 21227 | 587 | 123 |
9416 | 7421 | 5148 | 405 | 104 |
6557 | 5804 | 4973 | 504 | 89 |
4361 | 5643 | 4268 | 458 | 80 |
2322 | 4843 | 3530 | 434 | 64 |
2027 | 3530 | 2027 | 267 | 57 |
564 | 1904 | 234 | 51 | |
125 | 1584 | 213 | 21 | |
1375 | 192 | 18 | ||
974 | 184 | 11 | ||
831 | 124 | 7 | ||
564 | ||||
125 | ||||
续上表
pBR322/HinfⅠ | φχ174/HinfⅠ | φχ174/Hae Ⅲ | φχ174/TapⅠ | |
1631 | 726 | 140 | 1353 | 2914 |
517 | 713 | 118 | 1078 | 1175 |
506 | 553 | 100 | 872 | 404 |
396 | 500 | 82 | 603 | 327 |
344 | 417 | 66 | 310 | 231 |
298 | 413 | 48 | 281 | 141 |
221 | 311 | 42 | 271 | 87 |
220 | 249 | 40 | 234 | 54 |
154 | 200 | 24 | 194 | 33 |
75 | 151 | 118 | 20 | |
72 | ||||
二、常用缓冲液
1．分子克隆常用缓冲液
2．磷酸缓冲液
（1）25℃下0.1mol/L磷酸钾缓冲液的配制※
pH | 1mol/L K2HPO4(ml) | 1mol/L KH2PO4(ml) |
5.8 | 8.5 | 91.5 |
6.0 | 13.2 | 86.8 |
6.2 | 19.2 | 80.8 |
6.4 | 27.8 | 72.2 |
6.6 | 38.1 | 61.9 |
6.8 | 49.7 | 50.3 |
7.0 | 61.5 | 38.5 |
7.2 |
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