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ADVIA-120血球分析仪的临床应用

2019.5.18
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玉芳

致力于为分析测试行业奉献终身

                      

     与以往的血球分析仪一样,ADVIA120血球分析仪主要用于血细胞分析检查,所不同的是其速度更快,检测的项目更多,结果准确性更好。有核红细胞的鉴别是采用过氧化物酶技术标记来鉴定。仪器的优越性能及使用,我想在此不作介绍,主要针对一些临床参考指标及应用方面作一些介绍。

     ADVIA120五种模式可随意选择

     l      细胞计数+分类(CBC+DC

     l      细胞计数+分类+网织红细胞(CBC+DC+RTC)

     l      细胞计数+网织红细胞(CBC+RTC)

     l      细胞计数(CBC)

     l      网织红细胞(RTC)

 

ADVIA 120血细胞分析仪报告参数参考值及临床意义 

参数

参考值

临床意义

WBC白细胞总数

3.5-10.0X10^9/L

增高:各类细菌急性感染、组织损伤、白血病等;降低:病毒感染、造血受抑、药物或放射线影响。

RBC红细胞总数

3.5-5.5X10^12/L

增高:脱水、高热等,引起相对红细胞增高或真性红细胞增多症或缺氧等代偿性增多;降低:各类贫血。

HGB血红蛋白

110-165g/L

增高或降低:与红细胞相同,但还要注意参考MCV值及RBC形态

HCT红细胞比积

0.37-0.51

增高:红细胞增多症等,绝对红细胞增多或脱水等相对红细胞增多;降低:各类贫血

MCV红细胞平均体积

80-100fl

用于反应红细胞的病理变化,贫血的鉴别与诊断;增大:大细胞性贫血;减小:小细胞性贫血

MCH 平均血红蛋白含量   

27-32pg

增高:大细胞性贫血;降低:单纯小细胞性贫血及小细胞低色素性贫血

MCHC平均血红蛋白浓度

320-360g/L

增高:严重呕吐,频繁腹泻,慢性CO中毒,心脏代偿功能不全;降低:小细胞低色素性贫血

CHCM直接测定的平均血红蛋白浓度

330-370g/L 

当同MCHC的分别大于1.9g/dl时,提醒有关样本(高脂血与高胆红素血)会影响MCHC,但不会影响CHCM

RDW 红细胞体积分布宽度

11.5-14.5%

增高:说明红细胞体积大小不一致,临床主要有镰刀形红细胞贫血,恶性贫血,营养不良性贫血等

HDW血红蛋白含量分布宽度

22-32g/L

贫血的鉴别与诊断

CHDW血红蛋白浓度分布宽度


实验室研究用

CH平均红细胞血红蛋白含量

20-39pg

贫血的鉴别与诊断

PLT 血小板总数

100-300 X10^9/L

增高:急性化脓性感染,脾摘除术后,真性红细胞增多;降低:ITP、肝硬化、脾功能亢进等

MPV 血小板平均体积

7.2-11.1fl

目前尚无确切临床意义,可能与血小板功能有关

PDW 血小板体积分布宽度

15.3-20.5 fl

血小板体积大小不均时,PDW可增加,常见于血小板减低时

PCT血小板比积

1.66-2.63%

与血小板计数意义相同

MPC 血小板平均浓度

23.0-27.5 g/dL

与血小板功能有关

MPM 血小板平均质量

1.7-2.5pg

与血小板功能有关

Retic# 网红数量

40-79 X10^9/L

增高:提示骨髓造血功能旺盛,见于各种增生性贫血;降低:提示骨髓造血功能低下,常见于再障

Retic% 网红百分比

0.8-2.1%

同上

MCVr 平均网红细胞体积

103.2-126.3fl

实验室研究用

CHCMr 直接测定的平均网红蛋白浓度

23.5-28.7 g/dL

实验室研究用

RDWr 网红体积分布宽度

13.7-20.1%

实验室研究用

HDWr 网红蛋白含量分布宽度

2.8-4.0 g/dL

实验室研究用

CHr 直接测定的网红内血红蛋白含量

>26pg

用于评估制造红细胞的铁含量,监察铁及EPO治疗进展,儿童及肾透析病人缺铁的诊断

CHDWr 网红蛋白浓度分布宽度

3.0-4.7pg

实验室研究用

NEUT 中性粒细胞数量

1.9-8 X10^9/L

同NEUT%

NEUT% 中性粒细胞百分比

50-70%

增高:各种急性细菌感染,组织损伤等疾病;降低:病毒感染,造血功能受抑制药物或放射线等影响

LYMPH 淋巴细胞数量

0.9-5.2 X10^9/L

同LYMPH%

LYMPH% 淋巴细胞百分比

20-40%

增高:淋巴细胞白血病,病毒感染等传染性疾病

MONO 单核细胞数量

0.16-1 X10^9/L

同MONO%

MONO% 单核细胞百分比

3-8%

增高:单核细胞白血病,感染和传染性疾病等

EOS 嗜酸细胞数量

0-0.8 X10^9/L

同EOS%

EOS% 嗜酸细胞百分比

1-5%

增高:过敏,寄生虫感染等;降低到零:伤寒等

BASO 嗜碱细胞数量

0-0.2 X10^9/L

同BASO%

BASO% 嗜碱细胞百分比

0-2%

增高:炎症,重度感染,慢性粒细胞白血病

LUC 未染色大细胞数量

0-0.4 X10^9/L

包括大淋巴细胞,浆细胞,原始和幼稚细胞

LUC% 未染色大细胞百分比

0-4%

同上

Left Shift 核左移


以加号表示,见于慢性感染,骨髓增生性疾病

Atypical Lymph 变异淋巴细胞


以加号表示,见于病毒感染,骨髓增生性疾病,化疗,未溶解的红细胞

Blasts 原幼细胞


以加号表示,见于急慢性白血病,淋巴瘤,骨髓纤维化

MPXI髓过氧化物酶指数


对慢粒、类中性粒细胞白血病反应、骨髓异常增殖综合征有价值,增高见于活动性中、高度恶性淋巴瘤

MPO DEF髓过氧化物酶缺乏


报警参数,以加号表示

Imm Gran 未成熟粒细胞


以加号表示,见于髓细胞白血病,化疗,新生儿

ANISO 红细胞大小不等


以加号表示,见于小细胞贫血,大细胞贫血,缺铁性贫血经铁治疗后

MICRO 小红细胞


以加号表示,见于缺铁性贫血,血红蛋白病,溶血性贫血

MACRO 大红细胞


以加号表示,见于大细胞贫血,酒精中毒,溶血性贫血,新生儿

HC VAR 血红蛋白浓度不等   


以加号表示,见于镰刀细胞性贫血,缺铁性贫血,溶血性贫血,化疗病人

HYPER 高血色素性红细胞


以加号表示,见于遗传性球形红细胞增多症,镰刀细胞性贫血

HYPO低血色素性红细胞


以加号表示,见于缺铁性贫血,慢性感染,地中海贫血,铁幼粒细胞贫血

RBC Fragments 红细胞碎片


以加号表示,见于溶血性贫血,严重烧伤

RBC Ghosts 影细胞


报警参数,以加号表示

NRBC 有核红细胞


报警参数,以加号表示

Plt Clumps 血小板凝集


报警参数,以加号表示

Large Plt 大血小板


报警参数,以加号表示

 


      以上众多项目,除了平时应用较多的WBC、Hb等外,我想重要介绍一下网织红细胞方面的应用。  

ADVIA120的网织红细胞和红细胞参数在临床中的应用

l      鉴别诊断

l      监测和早期诊断

l      预后判断

l      疗效观察

l      铁缺乏的检测

l      地贫和血红蛋白病

l      rHu-EPO治疗

l      大细胞性贫血

l      遗传性球形细胞增多症

l      镰状细胞性贫血

l      网织红细胞的概念: 

      网织红细胞(下称网红)是尚未完全成熟的红细胞,是晚幼红细胞脱核后到完全成熟之间的过渡细胞,由于其胞浆内尚存在有嗜碱性的RNA物质,经煌焦油蓝或新亚甲蓝活体染色后呈浅蓝或深蓝色的网状结构,因此得名为网织红细胞。网红是反映骨髓造血功能的重要指标,特别是在贫血中扮演著极其重要的角色。

l      网红显微镜目测法,流式细胞网红计数仪,Bayer ADVIA-120分析仪的对照:

1.    网红显微镜目测法:

    迄今国内仍多采用显微镜目测法(下称目测法),可直观细胞形态且不需昂贵设备,不失为诊治贫血的重要实验方法,但操作费工费时,受主观因素影响,计数精确性较差为其不足。

2.    网红流式细胞仪法(Flow cytometer,简称FCM)

    近年来,国外多使用自动分析仪代替目测法,无论从实验方法学还是临床应用,均取得了良好效果,早在1983年有专家就应用FCM方法学进行网红计数,且在血液病的鉴别诊断和疗效观察取得了满意的结果。并评价了FCM方法与目测法的实验结果,发现前者的测量精确度比后者明显提高。因为流式细胞仪(flow cytometer,FCM)的问世,开创了生物细胞研究的新领域, 也为网红计数提供了快速、准确的测试手段,可以通过某些染料(如吖啶橙、派若宁-Y 、噻唑橙)与网红中RNA结合,在FCM方法测量时发出特定颜色的荧光, 进行单参数定量RNA,已知在红细胞发育过程中,RNA含量有明显规律性变化,即由原始阶段较为丰富逐渐减低至细胞完全成熟后消失或接近消失。网织红细胞为成熟红细胞前阶段,通过FCM方法检测RNA可精确表示网织红细胞占成熟红细胞的百分率(RET%)。网织红细胞计数仪的临床应用价值已被公认。但由于其仅能测试网织红细胞,常给临床诊断带来不便。

3.    BAYER ADVIA-120全自动细胞分析仪检测网红的方法学

    1993年以来,可进行网红计数的血液分析仪相继问世,使血细胞分析仪应用进入了新的阶段,其代表公司有很多,(例如Coulter Maxm型,Sysmex SE系列等)而BAYER-120全自动细胞分析仪不但能检测有关白细胞、红细胞、血小板等等几十项测量参数,还可得到网织红细胞的实验参数。其的测试方法首先将样本与ADVIA-120的网红试剂混合,因网红测试中含有RNA染剂OXUZINE -750(即核酸染料:氧氮杂芑-750。)它可渗透到网状红细胞膜内,将细胞质内的RNA加以染色,细胞质内含有RNA的网状红细胞将被染成蓝色,且依照RNA含量的多寡反应染色的程度。细胞膜内不含RNA的红细胞与血小板则不被染色。再利用光学系统,经光电二极管的处理,低角度散射光可测定出血球体积,高角度散射光可测定血球血红蛋白浓度,吸光度变化的测量可以计算RNA染色程度,利用以上三个测定值就可以测得完整的网织红细胞分析参数。其参数包括RET绝对值(网织红细胞计数)、网织红的百分数(RET%)、网红的平均体积(MCVr)、网红细胞分布宽度(RDWr)、单个网红内血红蛋白分布宽度(HDWr)、单个网红内平均血红蛋白浓度(CHCMr)、单个网红内血红蛋白含量(CHr),小红细胞比率(%Micro)低色素红细胞比率(%Hypo),及根据荧光强度,还可将网织红细胞分成低荧光强度网织红细胞(Low Fluorescent Reticulo- cyte 简称LFR)、中荧光强度网织红细胞(Middle Fluorescent Reticulocyte简称MFR )和高荧光强度网织红细胞(High Fluorescent Reticulocyte 简称HFR)三部分。幼稚的网红显示最强的荧光,反之成熟红细胞极少或没有荧光。为了评价ADVIA-120的有关精密度,重复性及速度以及它的线性范围。我科进行了重复多次的高,中,低值的测试,以及同目测法的对照,实践证明ADVIA-120能更准确地进行网红计数,且能快速地精确地检出目测法所不能的更多的有用的网红数据结果。 l      网织红细胞的有关正常参考值:

 

 我科以HGB120—160g/L ,MCV90—100fl,MCH27—34Pg作健康组用BAYER-120全自动细胞分析仪对300例正常人进行了分析,其结果见下表。

 

1-1 300例正常人网织红细胞检测结果

 

网织红计数   LFR    MFR    HFR     MCVr     RDWr    HDWr    CHr

 

x 1.1        88.1   11.2   2.6     112.0    17.85   33.8    25

 

s 0.40       3.78   4.01   1.77    5.5      2.35    5.4     4.0

 


l      网织红细胞的临床应用进展

     130年以前Feb观察到贫血病人的 RBC 中的颗粒并用苦味酸显示了它们, 而后Erhich用亚甲蓝染色后发现了网状结构并建立了网织红细胞目测法,一个多世纪以来这种方法在贫血的诊断、疗效估计、鉴别诊断中的重要作用众所周知,笔者不再赘述。现将仪器法进行网织红计数的临床应用简述如下。

l      缺铁性贫血要点

    缺铁性贫血是呈典型的小细胞低色素贫血,它的红细胞,血红蛋白浓度均减少,并有贫血的临床表现,且平均血红蛋白浓度(MCHC)〈26Pg细胞平均体积(MCV)〈80fl,平均血红蛋白含量〈0.31Pg单个网红内血红蛋白含量(CHr)〈25Pg,小红细胞比率(%Micro)/低色素红细胞比率(%Hypo)即M/H〈0.9可诊断为缺铁性贫血。缺铁性贫血是小儿的常见病,主要发生在6个月至3岁的婴儿。为了有效地诊断儿童缺铁的方法,我们经筛选将30例儿童,平均年龄2.9+/-2岁分为ß-地中海贫血,铁缺乏组(载铁蛋白饱和度TSAT〈20,〉及其它小细胞性贫血分为三组进行对单个网红内血红蛋白含量(CHr),小红细胞比率(%Micro)/低色素红细胞比率(%Hypo)即M/H作比较如下图1-2。从图中可明显看出单个网红内血红蛋白含量(CHr),小红细胞比率(%Micro)/低色素红细胞比率(%Hyp)即M/H对缺铁性贫血是很好的指标。

 

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l      网红的HFR,MFR,LFR的应用

 

我们以Hb 120~160g/L、MCV 90~100fl 、MCH 27~34pg的患者作为健康组;WBC<3×109/L、PLT<50×109/L 的化疗后红细胞生成抑制者为骨髓抑制组,以慢性溶血性贫血患者为溶贫组,I缺铁性贫血DA组、血液透析组,老年无贫血组(70 岁以上 Hb 120 ~160g/L、MCV 90~100fl、MCH 27~34pg)、老年贫血组(70岁以上Hb不足 110g/L且无明显病因的个体)测得的网织红细胞百分比、HFR ,MFR及LFR四项参数如下图可证实HFR 和LFR 可

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