稀释限制性内切酶时,建议使用稀释缓冲液(A,B,C)。建议临用前稀释且稀释终浓度不要小于1,000 units/ml。目录及说明书中标注了每一种内切酶相应的稀释兼容性。
注:以下稀释液不适用于耐热DNA聚合酶。欲了解稀释耐热DNA聚合酶的相关情况,请参见相应章节。
稀释缓冲液成份:
稀释液A: 50 mM KCl, 10 mM Tris-HCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 200 µg/ml BSA和50% 甘油 (pH 7.4 @ 25°C)。
稀释液B: 300 mM NaCl, 10 mM Tris-HCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 500 µg/ml BSA和50%甘油(pH 7.4 @ 25°C)。
稀释液 C: 250 mM NaCl, 10 mM Tris-HCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 0.15% Triton X-100, 200 µg/ml BSA和50%甘油(pH 7.4 @ 25°C)。
* 表示稀释时需要添加MgCl2至终浓度10 mM
可用稀释缓冲液A进行稀释的酶:
Aat II | BsaW I | Fat I | Nsp I |
可用稀释缓冲液B进行稀释的酶:
Acl I Afl III* Ale I Alu I Acu I Apek I Ase I AsiS I Avr II Bbs I Bbv I Bfa I BfuA I Bgl I Bmr I Bpm I* | Bsa I BsaX I BseY I Bsg I BsiHKA I BsmA I BsmB I BspM I* Bsr I* BssS I BstZ17 I Cac8 I CviA II Dpn I Dpn II Dra III | Eag I Fse I Hinc II Hind III Hph I HpyCH4 V I-Ceu I I-Sce I Kas I* Mme I Mnl I Msc I MspA1 I* Mwo I Nla III Nla IV | PI-Psp I PI-Sce I PpuM I Pvu I SfaN I Sfc I Sfo I Sph I StyD4 I Swa I Taq I Tli I Tth111 I Tse I TspR I |
可用稀释缓冲液C进行稀释的酶:
Age I BmgB I BsrF I EcoR I | Fsp I Nhe I Not I | Pst I Rsr II Sap I | Sfi I Ssp I Tfi I |