【摘要】 目的 探讨HBV血清标志物前S1抗原（HBVPreS1-Ag）与HBVDNA的相关性。方法 用ELISA法对乙肝患者分别进行五项HBV血清标志物，前S1抗原检测，同时采用PCR法检测HBVDNA的含量。结果 大三阳组前S1抗原（+）检出率均高于小三阳组。前S1抗原（+）组血清HBVDNA检出率为89%。结论 在HBV血清标志物、前S1抗原与HBVDNA联合检测为判断HBV复制和传染性以及指导临床治疗提供更可靠的实验依据。
【关键词】 血清HBV标志物 乙肝前S1抗原 荧光定量PCR HBVDNA
乙型肝炎是严重威胁我国人民健康的传染病，主要经血液传播。乙型肝炎病毒（HBV）感染人体后，血中可出现大量HBV颗粒。完整的病毒颗粒含有外衣壳抗原和内衣壳抗原，含有前S1的蛋白主要存在于Dane颗粒上，外衣壳抗原包括乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）、前S1抗原和前S2抗原。内衣壳抗原包括乙型肝炎病毒核心抗原（HBcAg）和e抗原（HBeAg）。前S1蛋白在病毒感染、装配、复制和刺激机体产生免疫反应等方面具有十分重要的作用。笔者对本院门诊及住院882例乙肝患者进行HBV五项血清学标志物，前S1抗原和HBVDNA的检测，以探讨HBV与前S1抗原和HBVDNA之间的相互关系，现报告如下。
1 材料和方法
1.1标本来源 2007年1月-2009年10月来本院就诊的门诊及住院患者同时检测乙肝五项血清学标志物、前S1抗原及HBVDNA检测共822例。其中男性531例，女性281例。年龄最小的13岁，最大的79岁，平均46岁。
1.2检测仪器 DNM-9602G酶标仪（北京普朗公司生产），DNX-9620洗板机（北京普朗公司生产） 7600PCR荧光定量扩增仪（广州产） 移液器（上海求精生化试剂仪器有限公司）。
1.3试剂 HBV五项血清学标志物（HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeA、bHBcAb）试剂盒均由厦门新创生物有限公司提供。乙肝前S1抗原（HBVPreS1）检测试剂由广州中山大学达安基因股份有限公司提供。
1.4检测方法 HBVDNA采用荧光定量PCR法。HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb,前S1抗原均采用酶联免疫吸附试验（ELISA法）检测。并严格按说明书操作。
1.5统计学处理 采用X2检验及配对t检验。
2 结果
822例乙肝患者血清标本中，前S1抗原阳性446例，阴性376例。HBVDNA阳性462例，阴性360例。由表（1）可知，大三阳组前S1抗原（+）检出率和HBVDNA阳性检出率均高于小三阳组，差异有统计学意义（P<0.001、P<0.05）
3 讨论
3.1 国内有报道前S1抗原是反映HBV感染的慢性化和严重程度及病毒复制的指标[1]。本文结果显示387例大三阳组中，前S1抗原（+）检出率为89%，其中HBVDNA阳性检出率达91%，与前S1抗原阳性率具有一致性。大三阳组和HBsAg(+)、HBcAb(+)组与小三阳组的差异有统计学意义。表明这些患者HBV具有较高的复制水平，具有传染性的重要标志。
3.2 236例小三阳血清中76例检出前S1抗原阳性。检出率为32%，82例检出HBVDNA阳性，检出率为35%。虽然阳性率低于大三阳组，但仍具有较强的传染性。
3.3 108例HBeAg(+),HBcAb(+)血清中前S1抗原阳性23例检出率为21%，有29例检出HBVDNA阳性，检出率为27%。提示该组患者仍具有较强的病毒复制，传染性强。此情况可能为血清转换期前C区突变，若经过动态观察，仍表现HBsAg(+)、HBcAb(+)及HBVDNA阳性，可能为前C区突变。[2]
3.4 21例HBsAg（+）、HBeAg（+）组的前S1抗原阳性为2例，检出率为10%。HBVDNA阳性3例检出率为15%。30例HBsAb（+）、HBeAb（+）、HBcAb（+）患者血清中，前S1抗原全部阴性，HBVDNA全部阴性检出率为0。有学者人为此现象有可能与HBVDNA前C区发生突变有关，出现免疫逃逸。
小结：本文检测结果表明，ELISA与PCR两种方法可更全面反映HBV感染与复制，几种血清学标志物模式都有一定的前S1抗原和HBVDNA检出率。由于前S1抗原和HBVDNA阳性表示HBV在体内复制，若仅以HBV血清标志物检查结果作为判断HBVDNA感染、传染性以及HBV是否在体内复制，有一定的局限性。文献报道HBVDNA的出现早于其他血清标志物，当受检者处于早期感染时PCR的高灵敏度可为早期诊断HBV感染提供依据[3]。因此，为临床提供DNA感染、复制及传染性判断以及指导治疗和观察疗效，建议联合乙肝标志物以及前S1抗原和PCR检测HBVDNA。[4]
参 考 文 献
[1] 邵军，马悦，杨学颖，等.乙型肝炎病毒前S2蛋白及其检测的临床意义[J].临床军医杂志，2000，28（4）：107.
[2] 袁庆，邵彩霞，焦震华.乙肝两对半、前S2抗原抗体及HBVDNA的相关探讨[J].国外医学临床生物化学与检验分册，2005，26（10）：752-753.
[3] 汤继先.PCR在检测HBVDNA中的应用[J].上海医学检测杂志，1994，9（4）：214.
[4] 敖必蓉，卢元全，血清HBV标志物、前S2抗原与HBVDNA检查结果的相关性[J].临床输血与检验，2009，11(1).
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