碱裂解法
氯化铯/溴化乙锭平衡离心法
层析法
实验方法原理 | 大量碱裂解方法不仅相当快捷可靠,而且可获得相当纯净的粗制DNA。煮沸法的大量制备也简单易行,但得到的DNA比较粗制。高纯度的质粒DNA可通过氯化铯/溴化乙锭平衡离心法或层析法进一步纯化粗制DNA得到。 |
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实验材料 | 培养基 菌株 |
试剂、试剂盒 | EDTA SDS 乙醇 乙酸钾 异丙醇 |
仪器、耗材 | 离心管 |
实验步骤 |
1. 往5 ml的含选择性试剂(通常是氨苄青霉素)的LB培养基或丰富培养基接种单菌落。于37°C剧烈振荡培养过夜。 3. 于 4°C,6000 g 离心 10 min。
展开 |
注意事项 |
1. 为提髙产量,应采用表面积较大及带折流板的烧瓶以尽量增大通气度;振摇速度大于400 r/min。
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