蛋白质的凝胶过滤分离
实验材料 | 蛋白质 |
---|---|
试剂、试剂盒 | 凝胶过滤缓冲液 |
仪器、耗材 | 布氏漏斗 凝胶过滤层析柱 分光光度计 |
实验步骤 |
1. 如果凝胶过滤的介质是干粉,则需在凝胶过滤缓冲液中完全溶胀。
4. 沿着一根顺柱子内壁而放的玻璃棒将凝胶混悬物倒入柱子至所设高度,再小心往凝胶顶部加入1 cm 高的一层缓冲液,并连接缓冲液贮存容器,取去堵着柱子输出管的注射器,用2~3倍柱床体积的缓冲液请洗柱子。
5. 流尽柱子凝胶顶部上面的缓冲液、关闭其输出管。
9. 用2~3个柱床体积的凝胶过滤缓冲液洗柱,柱子保存在含0.02%叠氮钠的缓冲液中,柱于可无限次地使用。
展开 |
注意事项 |
切勿用磁力搅拌器搅拌,让凝胶颗粒自然沉降,吸去或倾去不沉降的细小颗粒,或者根据厂商的使用指南进行处理,对预溶胀的凝胶,在布氏漏斗或玻璃烧结漏斗中用大量缓冲液冼去防腐剂,重悬于等体积的凝胶过滤缓冲液,倾入细颈过滤瓶中,在使用前进行脱气。
|