pH 稳定计法
显色法
| 实验方法原理 | |
|---|---|
| 实验材料 | 胆碱酯酶 |
| 试剂、试剂盒 | Tris-HCl 氯化乙酰胆碱 氯化镁 NaOH |
| 仪器、耗材 | 自动滴定器 |
| 实验步骤 |
空白对照：保持 pH 7.4，持续记录几分钟每次 0.01 mol/L 氢氧化钠的用量。 样品：加入酶溶液（例如 0.1～1 ml），保持 pH 7.4，并记录 5 min 每次 0.01 mol/L 氢氧化钠的用量。 计算 25℃ pH 7.4 时，每分钟一个单位水解的 1 umol 乙酰胆碱。
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| 注意事项 | |
| 其他 |
试剂： 0.02 mol/L Tris-HCl，pH7.4 2.2 mol/L 氯化乙酰胆碱（Mr＝181.7；40 g 溶于 100 ml 水中，碘化丁酰胆碱，Mr＝301.2） 0.2 mol/L 氯化镁（MgCl２·6H2O；Mr＝203.3；4.1 g 溶于 100 ml 水中） 0.01 mol/L 氢氧化钠标准溶液作为滴定剂，加入自动滴定器的滴管中 胆喊酯酶，溶于 H2O 中，1 mg/ml
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