乙酰胆碱酯酶的测定实验

乙酰胆碱酯酶

磷酸钾 氯化乙酰胆碱 白明胶 氢氧化钠

空白对照：保持 pH 7.4，持续记录几分钟每次 0.01 mol/L 氢氧化钠的用量。

样品：加入酶溶液（例如 0.1～1 ml），保持 pH 7.0，并记录 5 min 每次 0.01 mol/L 氢氧化钠的用量。

计算 25℃ pH 7.4 时，每分钟一个单位水解的 1 umol 乙酰胆碱。

试剂：

0.02 mol/L 磷酸钾，pH 7.0

0.005 mol/L 氯化乙酰胆碱（Mr＝181.7；91 mg 溶于 100 ml 水中）

0.01％ 白明胶，包括 0.2 mol/L 氯化钠和 0.04 mol/L 氯化钠（0.1 g 白明胶，11.7 g NaCl，8.1 g MgCl₂· 6 H₂O 溶于 1 L H₂O）

0.01 mol/L 氢氧化钠标准溶液作为滴定剂，加入自动滴定器的滴管中

乙酰胆喊酯酶，用 0.02 mol/L 磷酸钾 pH 7.0 稀释到约 20 U/ml