相比于其他方法,本方法简单快速,分离效果好,且无需对脂肪酸样品进行衍生化,为UPC2 技术在油脂相关分析领域的进一步应用和研究提供了参考。
植物油脂中的棕榈酸(C16∶0) 、硬脂酸(C18∶0) 、油酸 (C18∶1) 、亚油酸(C18∶2) 和亚麻酸(C18∶3)5种脂肪酸的含量变化会直接影响到油脂的性质和质量,所以建立一种快速、准确地检测上述5种脂肪酸含量的方法很有必要。
1.混合标准溶液的配制
准确称取棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸和亚麻酸等5种脂肪酸标准品,分别用正己烷配制质量浓度均为1g/L的各脂肪酸标准品储备液。其他浓度的工作溶液以此储备液用正己烷稀释而成。
2.样品制备
称取约2g大豆油置于50mL烧瓶中,加入4g20%的KOH溶液,加冷凝管于100℃油浴中回流反应8 h,停止加热。待反应液冷却后,加入4mL 2mol/L的H2SO4溶液进行酸化,卸下烧瓶,转入分液漏斗,静置分层,上层用水洗涤至中性,加入无水Na2SO4进行干燥,即得脂肪酸样品。称取约0.01g该脂肪酸样品于100mL容量瓶中,用正己烷定容,溶液经有机膜过滤后直接进UPC2系统分析。
3.UPC2色谱条件:
采用ACQUITY UPC2 BEH2-EP色谱;系统背压为2000 psi;色谱柱温度为50℃;样品室温度为10℃;;流动相分别为超临界CO2(流动相A)和甲醇-乙腈(体积比1∶1,流动相B);进样量为1μL;柱流速为1.0 mL /min;流动相梯度洗脱程序∶0~2min,98%~96%A;2~3min,96%A;3~4min,96%~90%A;4~5min,90%~98%A。
4.MS条件:
离子源为ESI-;毛细管电压为2.0 kV;锥孔电压为40V;源温度为150℃;脱溶剂气温度为500℃;脱溶剂气体流速为850L/h;锥孔气体流速为40L/h;SIR离子为m/z 255.42,283. 48,281. 46,279. 45,277. 43。
ACQUITY UPC2 系统
科研人员们可以用它来分离、分析和弄清那些LC和GC技术无法处理的物质,包括:疏水性和手性化合物;脂质;热不稳定样品;聚合物
由于其具有溶剂载量少、分离度高、峰形窄、分离速度快等特点,因此也可以作为MS的完美结合。
系统特征:
1.主要的流动相为压缩二氧化碳(CO2),与液体流动相或载气相比,降低了成本和毒性。
2.0.5μL至10μL的灵活可变进样体积,以及色谱柱与进样量相匹配的功能,可以最大程度减少样品损失,以及更换进样环的需要。
3.色谱柱快速再平衡和更短的运行时间,使您每天可以处理更多的样品。
4.共同溶剂和色谱柱转换功能,可以快速地筛选溶剂和色谱柱,提高了方法开发的灵活性。
Waters 2695-SQD
技术指标与参数:
四元梯度输液泵,溶剂数:四元,光电二极管阵列检测器 波长:190-800nm
功能与使用范围:
药品安全型评价研究、药代、毒代动力学研究。