饲料中盐酸克伦特罗的检测

方案优势     

盐酸克伦特罗做HPLC 分析时不需要衍生， 利用β-肾上腺素能激动剂分子可与C18 或C8 固定相分子相互作用，应用反相柱检测β-激动剂类物质，具有检测精密度高，专属性强，假阳性低的优点。             

采用标准     

NY438-2001《饲料中盐酸克伦特罗

方法/原理/步骤     

色谱条件 色谱柱：Hitachi LaChrom C18(5μm) 4.6mmI.D.x150mmL 柱 温：30℃ 流速：1.0 mL/min 检测波长：243nm 进样量：15μL 流动相： 0.05%磷酸水溶液：乙腈=89：11  标准溶液制备 准确称取一定量盐酸克伦特罗标样于10ml容量瓶，用甲醇超声溶解并定容，作为贮备液；稀释成浓度为2μg/ml的标准品溶液，用0.45μm滤膜过滤，进样测定。  样品溶液制备 1、 称取约5g饲料样品于100mL三角瓶中，准确加入100ml提取液（0.5%偏磷酸溶液：甲醇=80:20）， 超声提取15min后振摇15s，静置，取上清液于离心管中，4000转/分钟离心10min；用0.45μm滤膜过滤，进样测定。 2、 净化：移取离心过上清液10ml，置150ml分液漏斗中滴加2M氢氧化钠溶液，充分振摇，调pH=11~12，分别加30、25ml乙醚萃取两次，醚层通过无水硫酸钠干燥，并用乙醚定容至50ml。准确移取25ml于50ml烧杯中，置通风橱内，50℃水浴蒸干，残渣用2ml 0.02M盐酸溶解后，置SPE小柱上，分别用1ml含2%氨水的5%甲醇水溶液和含2%氨水的30%甲醇水溶液淋洗，最后用甲醇洗脱，洗脱液45℃氮气吹干，残渣中再加入2ml 0.02M盐酸超声溶解，用0.45μm滤膜过滤，进样测定。         

仪器设备     

仪器

1)四元梯度泵PM1110

2)自动进样器PM1210

3)柱温箱PM1310

4)紫外检测器PM1410

5) PM色谱工作站。           

实验结果     

1、标样测定

根据NY438-2001的色谱条件进行测定，得到的盐酸克伦特罗的峰形很好，因此选择该比例进行实验，出峰时间为12.62min，图1为盐酸克伦特罗标样的色谱图。

　　图1盐酸克伦特罗标样色谱图

2、重复性实验

对盐酸克伦特罗标准溶液重复进样6次，6针峰面积的相对标准偏差为0.07%，重现性很好，结果见下表

　　表1盐酸克伦特罗标样6针峰面积的重现性

3、饲料样品检测

某猪饲料样品经前处理后测定，在12.62min未检测到盐酸克伦特罗残留，实验结果见图2。

　　图2饲料样品与加标样品重叠色谱图

结论

采用日立Primaide高效液相色谱仪四元梯度配紫外检测器，准确测定了违禁药物盐酸克伦特罗的含量。在上述色谱条件下，可以使被测样品中各峰很好的分离，重现性良好。对饲料样品中该项目进行了检测，未检测到盐酸克伦特罗残留，方法简便实用，专属性好，适用于常规限量检测。