荧光探针标记法
实验方法原理 | 常用于研究膜脂流动性的荧光探针为1,6-二苯基-1,3,5-己三烯(DPH)。DPH掺入到细胞膜脂烃链区后,介质粘度增加,顺反异构受到抑制,成为唯一能发光的全反构型。 |
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实验材料 | 肿瘤细胞 |
试剂、试剂盒 | 磷酸盐缓冲液 DPH |
仪器、耗材 | 荧光分光光度计 离心机 |
实验步骤 |
1. 取对数生长期的肿瘤细胞,以pH7.2,0.01 mol/l 磷酸盐缓冲液洗涤两次。
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注意事项 |
由于DPH可进入细胞内部,后来又合成了其阳性离子衍生物1-(4-三甲胺苯基)-6-苯基-1,3,5-己三烯(TMDPH)。TMDPH不能透过细胞膜进入细胞,因此,理论上TMDPH标记法较DPH标记法更能准确的反映膜脂流动性。
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