实验方法原理 | 细胞在无限制培养基中培养,生长至包和密度。用放射自显影测定 3 H-胸腺嘧啶脱氧核苷标记细胞的百分比。 |
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实验材料 | 传代用的细胞 |
试剂、试剂盒 | 生长培养基 维持培养基 D-PBSA 胰蛋白酶 |
仪器、耗材 | 24 孔培养板 培养皿 |
实验步骤 | 一、材料 |
注意事项 | 1. 处理 3
H-胸腺嘧啶脱氧核苷必须十分小心,虽然它只能发射低能量的β射线,但它能掺入 DNA,从而引起放射线损伤。因此操作时必须戴上手套,不要在垂直层流
罩中操作 H3-胸腺嘧啶脱氧核苷,而应在生物危害或细胞毒存物层流罩中操作,按照处理放射性同位素的德方法规处理废弃的液体和固体。 2. 将盖玻片转移至 24 孔培养板,进行胰蛋白酶处理,以利于进行放射自显影。细胞可在悬浮状态下进行固定,然后滴于载玻片上进行染色制备(见 方案 16.7,无需进行低渗处理),也可用甩片机将细胞离心至载玻片上(见方案 16.4)或通过真空抽滤吸附到滤纸上(见方案 16.5)。 |