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为何B型钠尿肽(BNP)检测出现假阳性?

2019.12.13
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玉芳

致力于为分析测试行业奉献终身

    案例经过

    61岁的林大伯平时无烟酒嗜好,喜好散步。近4个月来,林大伯每于饭后自感胸闷,平时常感头晕。在省城大医院就诊时,查血压140/92mmHg,患者一般病史及临床检查都可,查血液心肌酶谱、肌钙蛋白I、血液生化和凝血指标均正常,仅D-二聚体轻度增高,甘油三酯(TG)195mg/dl。胸部X线检查心、肺和膈未见明显异常,胸部CT平扫、增强未见有明显异常。双肺动脉CT及MRI均未见有明显异常。经行冠脉造影术亦提示未见明显异常,心脏超声检查正常。给予降压、降脂、抗凝等对症治疗,患者症状好转。
患者经治疗后查了两次BNP,检验结果分别为1671.7 pg/ml和1890.28 pg/ml,这么高的BNP值却没有一点心力衰竭症状,主治医师又让患者去急诊室查NT-proBNP,结果<60 pg/ml,于是做好了解释,果断让其出院,让他继续门诊随访。

    鉴于该患者BNP检测值异常却无心衰症状的现象,主治医师电邮请教了一位BNP与心力衰竭方面的专家,该专家认为可能由于免疫检测中的异嗜性抗体干扰因素导致BNP假性升高。之后也证实林大伯二十几年前曾在田间劳作时有被老鼠嗜咬出血史。被老鼠咬过的人才有可能在体内产生异嗜性抗体[1],造成被标记抗体识别错误,从而出现假阳性升高。后来检验医师用ELISA检测到了林大伯体内存在较高水平的人抗鼠抗体(HAMA),也用几种方法证明了林大伯血浆BNP其实是正常的。

    分析与心得(临床)

    BNP在心室合成,它的含量与左心室压力等密切相关。基本上心功能不全越严重,BNP水平越高。心力衰竭Ⅰ级(纽约心脏协会分级标准)平均BNP水平是(162±16)pg/ml,Ⅱ级是(332±25)pg/ml,Ⅲ级是(590±31)pg/ml,Ⅳ级是(1960±34)pg/ml。这有助于心力衰竭的鉴别、治疗效果、预后的判断等临床应用[2]。但在临床上,由于患者病情复杂,BNP的升高是否可以诊断心力衰竭需要深刻了解BNP在临床诊断心力衰竭中的干扰因素,包括BNP检测方法学上的干扰。此案例从检验医生的角度考虑,患者血浆BNP的结果是“真实的”,而且多次检测还是很高。从临床医生的角度考虑,患者血液中存在高水平的BNP,其值相当于心力衰竭Ⅳ级,应该进一步进行详细的临床检查。本案例中,患者经全面检查,临床医师对于出现有异于临床症状的BNP异常增高检验值进行追根穷源,与检验医师及时沟通,最终证实BNP升高归因于患者血液标本的特殊性和方法的局限性,使得出现的问题及时得到科学、合理的解释,减少了医患纠纷。

    深度拓展(技术)

    案例中提到的“HAMA”,小编有话要说。(感谢抗体中心对以下内容的指导)
HAMA(Human anti-mouse antibodies,人抗鼠抗体效应。鼠源性单抗对人体具有异种蛋白的免疫原性,在人体内半衰期较短 ,多次使用可引起人抗鼠抗体 (HAMA)的产生,从而使其应用受到限制。
产生HAMA的原因主要有两个:经常接触老鼠;肿瘤病人进行鼠单克隆抗体的治疗。
HAMA效应的效应的假阳性模式(以乙肝检测为例):
标本中的人抗鼠抗体分别与固相HBsAb和标记HBsAb McAb(单克隆抗体)结合,形成固相HBsAb-HAMA-HBsAb复合物(双抗原夹心),产生假阳性检测信号。

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    如何消除HAMA反应:

    1.采用非鼠源的PcAb(多克隆抗体)或者不同种属的单抗

    2.切掉抗体FC段或者改造为其他种属抗体的FC段
3.使用阻断剂可以有效降低HAMA效应,但对于某些极强反应可能效果不太理想

    还有一种易出现“假阳性”的情况……

    RF引起的假阳性

    RF是一种自身抗体,能和多种动物IgG的Fc段结合。由于固相抗体和标记抗体均为IgG,双抗体夹心法测抗原可能有RF的干扰,产生假阳性。

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    解决办法:

    1.用IgG的Fab或F(ab’)片段作酶结合物替代完整的IgG;

    2.标本用联有热变性IgG的固相吸附剂G蛋白)处理;

    3.将热变性IgG加入到标本稀释液中;

    4.加入羊抗人IgG。

    小结

    综上,基于双抗体夹心检测是目前免疫学检测的主流方法,采用不同的标记方案可以实现高特异性、高灵敏度和快速检测的目的。但是,由于采用的抗体原料不同而导致的临床检测数据的不同及抗干扰能力的不同,时常会给临床检测带来困扰,在遇到这类检测数据时,临床上不能单一依靠某个检测项目的异常而对患者病情进行判断,要综合患者临床表现及其它项目结果,同时还要考虑到检测原理对易出现的干扰进行排除。

    准确的检验结果是检验和临床的共同责任。检验工作必须要和临床配合与沟通才能高效、快速、准确地为临床提供检测结果。

    参考文献
1.武建国,李晓军.实用英汉免疫学词典.南京:南京师范大学出版社,2001
2.王学晶,徐国宾,李海霞,等.化学发光免疫分析法测定血浆B型钠尿肽的评价及参考区间调查[J].临床检验杂志,2009,27(4):283-285


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