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毛细管等电聚焦电泳仪简介

2019.12.14
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

毛细管等电聚焦电泳仪(CIEF)是根据等电点差别分离生物大分子的高分辨率电泳技术。

一、分离机理:

毛细管内充有两性电解质载体(合成的具有不同等电点范围的脂肪族多胺基多羧酸混合物),阳极端装稀H3PO4溶液,阴极端装稀NaOH溶液。当施加直流电压(68V)时,管内将建立一个由阳极到阴极逐步升高的pH梯度。在电场作用下,蛋白质在此pH梯度中泳动,当迁移至pH值等于pI处时不再泳动,而被浓缩成狭窄的区带。

CIEF是在毛细管中进行等电聚焦,关键是减小电渗流,找到使分离区带迁移的办法。

运行步骤包括进样、聚焦和迁移等。

二、特点:

1、具有极高的分辨率,可分离ΔpI0.01pH单位的两种蛋白质。

2、由载体两性电解质作为载体。

三、应用:

1、可用于分离不同等电点的两性大分子,尤其在分离蛋白质方面显示了较大的优越性。

2、除用于测定pI外,还可用于分离其它方法无法分离的蛋白质,如免疫球蛋白、血红蛋白、血清转铁蛋白和低浓度生物样品。


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