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φ(Phi)小体染色检查

2019.12.19
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184****5725

致力于为分析测试行业奉献终身

(一) 原理
粒细胞系列的白血病细胞中形成的φ(Phi)小体与3,3,—二氨基联苯胺(DAB)及(或)过氧化氢基质液作用,以及硝酸酮处理的氢过氧化酶染色,能催化DAB氧化生成蓝色沉淀,定位于胞质中。
(二) 操作步骤
1 试剂配制
(1) 1.25%戊二醛固定液:0.1mol/L磷酸盐缓冲液(PH7.3)95ml,分析纯戊二醛液(25%浓度)5ml,分析纯纯甲醛液(37%浓度)2ml,混匀并调整PH至7.3。
(2) 基质液: 3,3,—二氨基联苯胺5mg,0.05mol/LTris-盐酸缓冲液(PH7.6)10ml,1%过氧化氢溶液0.1ml,将以上三者混匀。
(3) 0.5%硝酸铜溶液:用0.05mol/LTris-盐酸缓冲液(PH7.6)配制。
2 操作方法
(1) 新鲜干燥涂片放入1.25%戊二醛固定液中固定2分钟。
(2) 用生理盐水冲洗后保存在盐水中。
(3) 浸入基质液中作用3分钟。
(4) 用0.05mol/LTris-盐酸缓冲液(PH7.6)快速冲洗3次。
(5) 放入0.5%硝酸铜溶液2分钟。
(6) 用生理盐水冲洗,晾干后镜检。
3 染色结果
阳性结果为胞质中出现1条至多条纺缍状或细棒状的棕色小体。
4 正常参考结果
正常人血液及骨髓中各类细胞均为阴性反应。

 


(三) 临床意义
鉴别白血病类型:φ(Phi)小体是粒细胞系的白血病细胞一种病理改变所形成的,因此阳性结果仅在白血病细胞中出现,不但有助于白血病类型的鉴别,而且具有很强的病理价值。
(1) 急粒:白血性原粒细胞的胞质中φ(Phi)小体有较高的检出率。
(2) 急性早幼粒细胞白血病:异常早幼粒细胞胞质中φ(Phi)小体检出率高。
(3) 急淋:各阶段淋巴细胞φ(Phi)小体为阴性。
(4) 急单:各阶段单核细胞φ(Phi)小体为阴性。

 

备注:
1  所需试剂:分析纯戊二醛,分析纯纯甲醛(有),PH计(有),3,3,—二氨基联苯胺,过氧化氢(有),硝酸铜。
2  开展的项目可与四项组化一起检查,收费定为20元/例,即细胞化学包括POX、PAS、AS-DCE、NBE、Phi小体。
3  Tris-盐酸缓冲液(PH7.6)的配制。
4  普通参考书无此项目,一般医院亦无此项目开展,可作课题有助于将来总结。


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