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毛细管凝胶电泳仪简介

2019.12.27
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

毛细管凝胶电泳仪(CGE)是20世纪80年代后期发展起来的毛细管电泳分离模式。它是将凝胶电泳仪对生物大分子的分离能力与毛细管电泳仪的快速、微量和定量分析相结合,是当今分离度极高的一种分离技术。

一、工作原理:

将聚丙烯酰胺等在毛细管中交联生成凝胶,以凝胶作为载体进行电泳,凝胶具有多孔性,类似分子筛的作用,样品分子按大小分离。

二、凝胶类型:

1、无机凝胶:

(1)多孔硅胶。

(2)多孔玻璃。

2、有机凝胶:

(1)聚丙烯酰胺。

(2)琼脂糖。

三、凝胶柱制备:

CGE的关键是凝胶柱的制备,常用聚丙烯酰胺凝胶进行DNA片段分析和测序。测定蛋白质和肽的分子量常用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺电泳(SDS-PAGE)。

将单体丙烯酰胺溶液中的交联剂N,N′-甲叉双丙烯酰胺(Bis)的浓度降为零,得到低粘度线性非交联的亲水性聚合物用作操作溶液,来代替高粘度交联聚丙烯酰胺,仍有按分子大小分离的作用。无胶筛分柱易制备,使用方便,但分离能力比凝胶柱差。

四、特点:

1、抗对流性好,散热性好,分离度极高。

2、能有效减小组分扩散,峰形尖锐。

五、应用:

蛋白质和DNA等的荷质比与分子大小无关,CZE分离模式很难分离,采用CGE能获得良好分离。


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