没食子酸丙酯(PG),245-三羟基苯乙酮(THBP),叔丁基羟基邻苯二酚(TBHQ),二氢愈创木酸(NDGA),丁基羟基茴香醚(BHA),二叔丁基羟甲基苯酚(Ionox-100),没食子酸辛酯(OG),丁羟基甲苯(BHT)十二烷基没食子酸酯(DG)。
1.1 仪器和试剂
高效液相色谱仪,带紫外检测器;
提取器:25 mL具塞玻璃离心管;
液体混匀器;
离心机;
旋转真空浓缩仪。
乙腈、甲醇:色谱纯;
正己烷、异丙醇:分析纯,重蒸;
乙酸:分析纯;
水:重蒸水;
乙腈饱和正己烷和正己烷饱和乙腈:将乙腈和正己烷摇匀2分钟,使彼此饱和,分层放置。
纯化过程采用饱和溶剂,抗氧化标准为PGIonox-100BHT TBHQ NDGA、OG DG THBP和BHA;
标准储备液(1.00 mg/ml):制备异丙醇乙腈1+1,v/v冷冻保存。
标准工作液:使用前用异丙醇-乙腈1.1V稀释至适当浓度
1.2 色谱条件
流动相:A=1.5%v/v醋酸甲醇溶液B=1.5%v/v醋酸水溶液;
色谱柱:RP-C18(5μm,250 mm×4.6mm I)。保护柱:RP-C18 (5 μm,40 mm×4.6 mm i.d.)。
柱温:40℃;
检测波长:280 nm;
进样量:20 μL。
1.3 实验方法
将1.00 g样品在萃取器中称重,并添加5 ml乙腈饱和正己烷。油样在液体混合器上摇晃片刻以充分溶解。将10ml正己烷饱和乙腈添加到液体混合器中。将乙腈层快速混合1分钟,离心3 000 r/min,将乙腈层转移至50 ml浓度瓶中。正己烷层用乙腈层萃取两次,每次10ml,用乙腈层浓缩。在瓶子里。在40℃水浴中,将浓缩液在旋转真空中浓缩至1mL左右,将浓缩液转移到5mL校准管中,用少量异丙醇清洗浓缩瓶,将洗液组合在校准管中,将异丙醇的体积固定在2mL,用0.45μm滤膜过滤,用高效液相色谱法(HPLC)进行分析,并采用外标法进行定量分析。