平衡色谱柱与足够的时间每天,你将得到的“补偿”在处理问题,你的色谱柱将活得更长!
新柱在使用前应在您自己的液相色谱仪上进行性能测试,即使柱效是由附在柱上的检验报告上的测试条件和样品决定的。此外,在今后的使用中,色谱柱应不时进行测试。
套筒柱安装(无预柱)
1.将卡套架套入柱芯;
2.在柱芯槽内插入两件夹壳,使柱芯高于夹套;
3.将设置在柱芯上的夹套架向上推至高于夹套件;
4.将外套帽与外套架一起旋转,然后用手将其拧紧;
5.然后按相同顺序连接列的另一端。
6.连接到液相色谱仪,窥视连接器手螺丝;如果不锈钢接头应使用特殊扳手。
注:使用夹套柱时,两端的夹套应始终与芯子连接。无论是平衡色谱柱还是清洗,都不能随时取出夹子,否则会造成包装的丢失。
液相色谱仪
套筒柱安装(带预柱)
1.将卡套架套入柱芯;
2.在柱芯槽内插入两件夹壳,使夹套高于柱芯;
3.将设置在柱芯上的夹套架向上推至高于夹套件;
4.将“子弹头“预柱放入卡套片内;
5.将外套帽与外套架一起旋转,然后用手拧紧;
6.然后按相同顺序连接列的另一端。
7.连接到液相色谱仪,窥视连接器手螺丝;如果不锈钢接头应使用特殊扳手。
更换色谱柱过滤器和玻璃棉过滤器同时维修色谱柱
注:在拆卸反相柱芯的滤芯和玻璃之前,应用水和甲醇/乙腈充分冲洗,修复工具的头也应浸入少量的甲醇/乙腈,以避免在拆卸过滤器和玻璃棉过滤器时取出柱内的填料。
1.将两个维修工具插入芯件顶部。
2.将修复工具的3只轻轻旋转至所覆盖2的柱的核心,顺时针旋转以拧紧;
3.一只手握住芯,另一只手轻轻地将其拔出。拆下芯顶部的滤清器。
4.用小铲子轻轻移除滤芯下的玻璃棉及受污染的包装;
5.用甲醇湿润新的填料,然后填充挖出的部分并将其压平。
6.安装新的玻璃棉过滤器,并将玻璃棉压在柱芯顶部,并使用4台修复工具;
7.将2放在柱芯的顶部,然后通过引用将筛选器放入其中。
8.压,然后取出2个,再用4把滤器边缘压平..
平衡柱和反相柱在工厂试验后储存在乙腈/水中。一定要确保你使用的流动相是与乙腈/水混溶的由于色谱柱在储存或运输过程中可能会干燥,在对样品进行流动相分析之前,应使用10-20倍柱体积的甲醇或乙腈平衡色谱柱如果所用流动相含有缓冲盐,应注意到纯净水的“过渡”。
硅胶柱或极性柱经工厂试验后储存在正庚烷中如果柱需要含有水的流动相在使用流动相之前用乙醇或异丙醇平衡。
如何平衡色谱柱?
在平衡过程中,流速增长缓慢。
使用流动相平衡柱直到获得稳定的基线如果缓冲盐或离子对试剂的程度较低,则需要很长时间来平衡
柱再生,应该使用适度的泵,我们建议不要使用你的高效液相色谱泵。
建议用来冲洗的溶剂体积
柱尺寸柱体积用于柱体积的溶剂的柱体积
125-4 1.6ml 30ml
250-4 3.2ml 60ml
250-10 -20ml 400ml
请根据下表选择您的再生方法:
极性固定相(如Si,NH2*二醇色谱填料)的再生:
正庚烷氯仿乙酸乙酯丙酮乙醇水
非极性固定相(如反相色谱填料RP-18、RP-8、CN等)的再生
水→乙腈→氯仿(或异丙醇)→乙腈→水
0.05m稀硫酸可用于污染色谱柱的清洗。
注意:
当NH2改性色谱柱再生时由于NH2可能以铵离子的形式存在应在洗涤后用0.1M氨清洗然后用水冲洗直到碱溶液完全流出。
如果简单的有机溶剂水处理不能完全去除硅胶表面的吸附杂质0.05M稀硫酸冲洗是非常有效的。
色谱柱的维护
1.采用柱前保护分析柱(硅胶在极性流动相离子流动相中具有一定的溶解度);
2.大多数反相色谱柱的ph稳定范围为2-7.5尽可能不超过色谱柱的ph范围。
3.避免流动相的组成和极性发生剧烈变化;
4.流动相在使用前必须脱气过滤。
5.若以极性或离子缓冲溶液为流动相,实验后应将柱清洗并保存在较大的乙腈中。
6.压力升高是需要更换预柱的信号。