液相色谱荧光检测器是由双路固定波长荧光检测器的中压泵浦灯发出的连续光通过半反射半透镜分成两束再经过测量池和参比池特别是大约10%的激发光被反射到参考细胞和相应的光电倍增管上液相色谱参比池有利于消除流动相发射的背景荧光和外界影响，参比光路也有利于消除光源波动的影响约90%的激发光被激发光滤光器分离，并选择固定波长的光作为样品的激发光。光束的荧光强度与样品浓度成正比，是荧光检测器定量测定的基础。为了避免受激光的干扰，在通过光电倍增管和放大器到达记录器之前，选择激发光的直角方向上的荧光，并通过第二透镜会聚到发射滤光器中。
液相色谱荧光检测器的灵敏度是紫外检测器的100倍。它是一种选择检测痕量组分的有力工具但其线性范围较窄不能作为通用的液相色谱检测器但可用于梯度洗脱。不能用抑制或吸收荧光的可熄灭溶液作为流动相来测定。对于不能直接产生荧光的物质,应采用柱后衍生技术,但操作较为复杂,荧光检测仪已广泛应用于临床医学,生化工业、环境监测和食品检测等领域。
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