近年来电子顺磁共振波谱方法得到相应的发展，建立了对半胱氨酸残基具有特异性的甲硫代磺酸自旋标记（MTSL）和双半胱氨酸自旋标记方法，电子顺磁共振波谱可以实现在溶液中对大分子蛋白、膜蛋白等的检测，并且能够进行蛋白折叠的实时检测。人们称这类自旋标记为位置定向的自旋标记（site directed spin IabeIing，SDSL），电子顺磁共振波谱这种方法从常规X波段EPR发展到高频、停流（stopped-fIow）以至时间分辨（time-resoIved，TR）的EPR技术，电子顺磁共振波谱逐渐成为研究酶和蛋白二级和三级结构、确定活性位置空间构象及其变化的不可替代的重要方法。目前常用的标记物主要是氮氧自由基，可以不同的需要所选择的烷、芳基或其他有机取代基。
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