黄曲霉素(Aflatoxins)
黄曲霉素存在于花生、棉籽粉、玉米、干辣椒粉等食品中。霉菌的生长并不一定表明黄曲毒素的存在,因为黄曲毒素只有在湿度、温度适合及通风良好才会生成。黄曲霉素B类具有蓝色荧光,G类具有绿色荧光。除了蔬菜中常见的(B1,B2,G1,G2),还有存在喂食了有毒饲料的奶牛的牛奶中的黄曲霉素M,其中毒性最高的M的代谢物为4-羟基化的产物Bs.
1993年黄曲霉毒素被世界卫生组织(WHO)的癌症研究机构划定为1类致癌物,是一种毒性极强的剧毒物质。黄曲霉毒素的危害性在于对人及动物肝脏组织有破坏作用,严重时,可导致肝癌甚至死亡。在天然污染的食品中以黄曲霉毒素b1最为多见。其毒性和致癌性也最强。
1根据国标《GB/T 18979-2003》,使用柱后衍生方法可以在一次测定过程中,在同一荧光发射波长下同时检测出这六种黄曲霉素。(Pickering公司提供)
经过黄曲霉素免疫亲和柱净化,经过柱后后衍生荧光检测。
纯化回收率
基质 | B1 | B2 | G1 | G2 |
玉米(Alfa 10ppb,OTA 14.3ppb) | 107% | 91% | 103% | 75% |
大米(Alfa 10ppb,OTA 14.3ppb) | 107% | 93% | 98% | 85% |
麦芽(Alfa 10ppb,OTA 14.3ppb) | 98% | 99% | 97% | 70% |
葡萄干(Alfa 10ppb,OTA 14.3ppb) | 99% | 106% | 101% | 69% |
分析条件:
色谱柱:MYCOTOX柱,1612124。
温度:42℃
流速:1.0mL/min
流动相:MeOH,CH3CN,H2O; 22:22:56,
柱后衍生条件:
柱后衍生系统:Pinnacle PCX 1.4mL反应器
温度:95℃
试剂:I2 100mg/L 水溶液
检测:荧光检测,氙灯
激发波长:365nm 检测波长:430nm
2. 根据国标《GB 5413.37—2010》食品安全国家标准乳和乳制品中黄曲霉毒素M1 的测定
(摘自Sigma-Alchrich 公司)
色谱柱:Ascentis Express C18, 2.7um, 2.1×100mm
柱压:230bar
流 速:0.3ml/min
柱 温:35℃
试液温度:20℃
进样量:10ul
流动相:A液,0.1%甲酸溶液; B液,乙腈-甲醇溶液(1+1)
时间(min) | 流动相A% | 流动相B% | 梯度变化曲线 |
0 | 68.0 | 32.0 | |
4.25 | 55.0 | 45.0 | 线性 |
5.00 | 0.0 | 100.0 | 线性 |
5.70 | 0.0 | 100.0 | 即时 |
6.00 | 68.0 | 32.0 | 线性 |
3 高效光化学反应法测定黄曲霉素B1(摘自LcTech)
此法检测成本低,可用等度HPLC直接测定
流动相:水/甲醇/乙腈:60/30/15 (v/v/v)
流速:1.2mL
进样量:100uL
色谱柱:RP C18
荧光检测:发射波长:365nm,接收波长:460nm
光化学衍生是一种简单、便宜、灵活的技术,可提高很多分析物质检测的灵敏度和选择性。黄曲霉素B1可在8分钟以内出峰,且检测信号明显增强。
4根据《 GBT 17480-2008 饲料中黄曲霉毒素B1的测定酶联免疫吸附法》
LCTech AflaREAD
ELISA试剂盒能够定量检测黄曲霉素B1,即使是浓度很小的黄曲霉素B1,也能够定量检测。ELISA试剂盒能够快速、容易的从多种产品中分析出黄曲霉素B1,如坚果、杏仁、大米、玉米、香料或动物饲料。AflaREAD
的检测限非常低,为0.1 ppb.