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细胞在MVE液氮罐保存方法及步骤

2020.3.24
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maxiaotu

致力于为分析测试行业奉献终身

MVE液氮罐也被众多领域所应用,不管是生活中还是生产中都能看到它的身影,如医疗行业,生物医学行业,金属生产行业以及精密仪器等。今天为大家介绍的是细胞在液氮罐保存方法及步骤

一、MVE液氮罐的应用范围及用途

1.在生物医学行业中的应用:目前主要是用于牛、羊等优良种公畜以及珍惜动物的精液保存,以及远距离的运输和医学中的疫苗、菌毒种、细胞以及人、动物的器官等浸泡于成都金凤液氮罐储存的液氮中,长期活性保存。

2.在金属生产行业中的应用:利用成都金凤液氮罐中储存的液氮对金属材料进行深冷处理,可以改变金属材料的金相组织,显著提高金属材料的硬度、强度和耐磨性能。

精密仪器电子行业中的应用:将精密零件经过液氮深冷处理后进行装配,提高零件装配质量,从而提高设备或仪器的整机性能。

3.医疗卫生行业的应用:用液氮容器内储存的液氮作为制冷剂进行手术,治疗或冷藏冷冻细胞、组织等。冷疗仪用于医院临床各科室能够代替手术,安全无毒,无害痛苦少,不损害健康组织,杀菌效果良好。

4.美容领域的应用:主要用液氮的超低温来处理皮肤表层。如采用手术治疗,疤痕往往是不可避免的后遗性缺陷,而冷冻治疗却不会出现这些情况,而且效果也比较理想。

二、细胞在液氮罐保存步骤:

怎么在液氮罐里储存细胞呢?一般来讲,冻存细胞的步骤会影响到细胞复苏时的活力,所以在使用液氮罐储存细胞时应小心并按步骤操作:

1、预先配制冻存液:10 % DMSO + 90%胎牛血清,4℃冰箱保存预冷;

2、用胰酶对细胞进行消化:倒去培养瓶中的培养基或用枪小心吸去培养板中的培养基,PBS冲洗两次,用胰酶消化细胞(尽可能温和);

3、再次用完全培养液悬浮细胞,将预冷的冻存液加入消化完全的细胞中,用滴管轻轻吹打混匀。

4、在每支冻存管中加入1ml细胞液,密封后标记冻存细胞名称和冻存日期。

5、冻存步骤的细致直接关系到细胞复苏时的活力,如果有程序降温器(放在-80℃冰箱过夜,放入液氮罐;或者可以在4℃,2h;

三、细胞在MVE液氮罐的储存分为两种:

液氮罐里一般灌有低温液氮,细胞的储存需要低温环境,放入-196度的液氮里对细胞是长期保存的一个适合的环境。常规液氮罐是将细胞存入液氮罐的液相里储存,有专用的方形抽屉式提篮,2ml冻存管放入冻存盒然后再放入提篮后浸入液氮里,完全浸入。使细胞完全处于液氮-196度环境下,才能够长期保存细胞。

 


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