细胞冻存液氮罐的具体操作步骤:
1、培养皿或培养瓶中细胞按常规方法消化,或分离获得原代细胞后,收集于离心管中。
2、使用离心机离心,去除上清,收集细胞沉淀。
3、根据细胞生长密度加入适量的LiveCyteTM细胞冻存液进行重悬,充分混匀。
4、将细胞悬液分装至冻存管中,直接放置于-80°C冰箱保存。24小时后可移入液氮长期保存(可选)。
细胞冻存液氮罐的细胞复苏流程:
1、从-80°C冰箱或液氮罐中取出细胞。
2、迅速放入37°C水浴,并不时摇动,在3分钟之内使其完全融化。
3、在冻存管中加入少量完全培养基,再将细胞混合液移入含有该细胞完全培养基的离心管中,样品和培养基比例为1:10,然后轻轻吹打,混合均匀。
4、离心后去除上清,收集细胞沉淀。
5、轻轻弹松细胞沉淀,加入适量培养液后接种于培养瓶或培养皿中,轻轻晃动使细胞分布均匀,置于37℃孵箱中培养。