1.3.色谱图中所有峰拖尾或峰变形通常是由物理作用导致的，而非化学作用。
如果色谱图中的峰形均表现相同类型的变形（图3），则问题最早应出现在分析物通过色谱柱迁移之前（主要问题发生在分析物在色谱柱中迁移之前）。
这种峰形变形最常见的致因是：玻璃料或柱头的空隙部分堵塞（此类峰变形最常见的原因是筛板部分堵塞或色谱柱头塌陷）。
除非在推荐的pH范围之外使用色谱柱，否则现在的柱子基本不会受到空隙的影响（轻易不会发生塌陷）。
但是，玻璃料（筛板）堵塞仍然是一个普遍存在的问题。对于5m颗粒柱（的色谱柱），入口端的玻璃料（筛板）通常具有2.0m的孔隙度；对于（颗粒）3m的色谱柱，具有0.5m的孔隙度。
如果颗粒物来自于样品，或颗粒物是因泵密封磨损或流动相到达色谱柱而产生的（磨损的泵密封圈或者流动相颗粒物进入色谱），它们通常会集中在玻璃料上（都聚集在筛板上）。
这些颗粒会影响样品在色谱柱入口端的分流，使得部分样品通过不同的流动路径到达色谱柱，因此会晚于另一部分样品。
由于此时（此位置）未发生分离，因此所有分析物会以相同的方式变形（被扰乱），进而色谱图显示所有峰均具有相似（类似）的峰拖尾或变形。
为了防止（避免）这一问题，如果流动相可能含有颗粒（如缓冲沉淀物或灰尘），应对其进行过滤；并在泵密封严重磨损（导致颗粒物的产生）之前更换新的泵密封（密封圈）。
如果样品含有颗粒碎片（屑），应对样品进行过滤（例如0.5m孔隙度过滤器（微孔滤膜））或对其进行短暂离心（例如5分钟，>1500×g），以去除颗粒。
我们强烈建议在自动进样器下游（之后）安装0.5m孔隙度的串联（在线）过滤器，以过滤任何意外进入HPLC系统的颗粒物。如果串联（在线）过滤器玻璃料（滤片）发生堵塞，系统背压会升高；而更换玻璃料（滤片）十分简单、快速和经济。采用串联（在线）过滤器可显著延长色谱柱的使用寿命，而且经济实惠。
图3. 由于玻璃料或色谱柱空隙被部分堵塞（色谱柱筛板部分堵塞或色谱柱塌陷），色谱图中所有峰形均出现了变形。
1.4.如果峰形解析不正确（未完全分离的重叠峰），可能会被误认为柱（色谱柱）或缓冲液的问题。
如果仅部分解析两个峰形（两个峰仅有部分分开），则可能会认为其是裂峰或双峰。如图4显示的情形。
在图4a中，可观察到与图3极为类似的峰值变形（峰变形），其表明玻璃料被堵塞（筛板堵塞）。
改变柱并未纠正这个问题（更换色谱柱不能解决此问题），所以玻璃料（筛板）堵塞并非导致这一现象的原因。如果柱上样品的质量减少（减少上样量）（图4b），峰形看起来更像是两个峰，而不是一个肩形峰。
这便需要进一步研究，以确定是否存在第二个峰。可以通过修改方法条件来完全分离两个峰（由此进行了进一步的研究，证实了存在第二个峰。
调整方法的条件后，两个峰完全分离）。
图4. 由于存在第二个组分而产生分裂峰。
（a）25ng / mL，和（b）等离子体中10ng/ mL的药物（第二个峰）（10 ng/mL血浆中的药物（第二个峰））。来源[1]。
1.5.由于目前的色谱柱性能优良，因此极不可能出现伸舌峰（伸舌峰的现象随着现今柱填充技术的提高已相当少见）。
伸舌峰一般是由柱过载或柱结构塌陷导致的（发生伸舌峰的一个原因是色谱柱内发生沟流或色谱柱结构的坍塌）。
如果在制造商推荐的条件下使用色谱柱，这种情况则很少发生。
大多数硅胶柱在pH2-8的范围内可以保持稳定。
pH低于2时，键合相会发生水解；pH高于8时，硅胶会溶解。
如果（如果您需要）在此pH范围以外使用（操作）HPLC系统，请确保选择在选定条件下会保持稳定的色谱柱。
图5显示了因柱过载（色谱柱发生沟流）导致的伸舌峰。
图5a中显示了正常的峰值形（峰形）;在大约500次注射（进样）后，观察到伸舌峰（图5b）。
使用这种方法便会出现这种变化，并且在每次运行的过程中会经常出现（这种改变是该方法所特有，经常在前一次分析结束后，下一次分析开始时突然发生）。
出现伸舌峰后，唯一有效的解决办法就是更换色谱柱。
该柱为100x2.1mm（直径（内径）），色谱柱填充5mC18颗粒（柱内填充5μm 粒径的C18填料） 。流动相A是10mM碳酸氢铵（pH9.0） ； B是甲醇（MeOH）。
该方法包括5％B等度洗脱段，接下来是80％B的冲洗（然后用80%B淋洗）。
这种特殊的色谱柱可专门用于高达100％的水流动相，且无封端。
当流动相pH值升高时，封端可保护硅胶免于溶解。
在这种情况下，所使用的色谱柱流动相pH应远高于推荐的范围，并且无需保护性封端。硅胶在pH为9时会逐渐溶解，直到柱床结构不再稳定，并且柱床会发生移动，
产生空隙（塌陷）或通道，而这又会导致图5b伸舌峰的形成。
可以使用较低的流动相pH或采用在较高pH下能够保持稳定状态的色谱柱，以避免这一问题（避免这一问题）。
图5. 过载导致的伸舌峰。（a）正常的峰形；（b）伸舌峰。来源[2]。
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