分析测试百科网

搜索

喜欢作者

微信支付微信支付
×

带你重新认识CD3e和人源化CD3e小鼠(B-hCD3e mice)(一)

2020.4.13
头像

王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

在这“草长莺飞”的季节,带你重新认识CD3e!

背景介绍

CD3e( CD3e molecule)编码CD3-epsilon多肽,与CD3-gamma,-delta,-zeta和体细胞受体alpha/beta或gamma/delta共同构成TCR-CD3复合物。此复合物在抗原识别和细胞内信号转导途径方面起着非常重要的作用。近年来,利用人CD3和肿瘤相关抗原(TAA)的双特异性抗体进行抗肿瘤治疗手段被广泛研究。

但由于小鼠CD3复合体的胞外区与人类种间同源性相对较低,人CD3特异性治疗抗体不能有效激活小鼠效应T细胞,需建立一个适合于评估人类CD3特异性治疗的实验动物模型。百奥赛图人源化CD3e小鼠(B-hCD3e mice),为双抗的药效验证提供了有力工具。

TCR-CD3 complex and its signal pathway[1]

mCD3e全人源化小鼠分析

将mCD3e全人源化替换为hCD3e,对纯合后代脾脏,胸腺,PBMC及淋巴结进行流式细胞分析,观察小鼠T细胞发育是否正常。

以上研究结果表明,相对于野生型,hCD3e全人源化纯合小鼠脾脏,胸腺,PBMC及淋巴结中mCD3+细胞含量较低且CD4、CD8分化差异较大,表明全人源化策略致其T细胞发育过程受阻,此方案制备的小鼠不适于后续药理药效评价。

基于此,考虑到全人源化可能对mCD3e胞内信号传递的影响,百奥赛图重新优化打靶方案,仅对mCD3e进行胞外区人源化改造,保留其鼠源的信号传导功能,得到B-hCD3e mice.同样对其纯合后代脾脏,胸腺,PBMC及淋巴结进行流式细胞分析,结果如下:

以上研究结果表明,mCD3e胞外区人源化纯合小鼠(B-hCD3e mice)脾脏,胸腺,PBMC及淋巴结中,各细胞细胞比例与野生型小鼠相比无显著差异,表明T细胞分化未受胞外区人源化改造影响。

不是所有人源化小鼠都能有正常功能,不是所有CD3人源化小鼠都叫B-hCD3e mice哦!

后续基于B-hCD3e mice模型的体外检测及体内药效等实验数据也进一步证明了该模型的优势所在,具体信息如下所示:B-hCD3e mice基本信息
 

基本信息


打靶策略

蛋白表达分析

流式分析结果显示:野生型 C57BL/6 小鼠中检测到mCD3+蛋白表达,纯合B-hCD3e小鼠中检测到hCD3+蛋白表达。


互联网
仪器推荐
文章推荐