辣根过氧化物酶(HRP)标记试剂盒的应用

活化的过氧化物酶是辣根过氧化物酶（HRP），其天然碳水化合物（糖）已被高碘酸盐轻度氧化以产生胺反应性醛基。 活性过氧化物酶的这些羰基自发地、有效地与抗体或其它蛋白质上的伯胺交联。该方法比其它胺反应性化学试剂，如戊二醛偶联更有效，戊二醛偶联常常导致聚合反应和更高程度的偶联失活。 预活化的酶消除了从头开始制备和验证活化的过氧化物酶所固有的困难。

为什么推荐Abbkine的LliKine™辣根过氧化物酶(HRP)标记试剂盒？

LinKine™ HRP标记试剂盒提供一个简单快速的方案，专门用于将HRP直接偶联到含有一个自由氨基的蛋白质，多肽或者其它配体上。

Tips：

* 待偶联的抗体最好溶解于无氨的缓冲液中(如：MES, MOPS, HEPES, PBS)，浓度为10-50mM，pH为6.5-8.5.

* 常用的非缓冲盐（如氯化钠），螯合剂（如EDTA）和糖对偶联效率没有影响。 我们不建议在叠氮化钠存在下进行HRP偶联，或者向HRP结合的抗体中加入叠氮化钠。甘油浓度即使高达50％也不对偶联效率产生干扰.

* 抗体用于标记的理想摩尔比为，抗体：HRP = 1:4 到 1:1之间 .（浓度在0.5-4mg/ml内的抗体，通常效果最佳 .）

HRP标记试剂盒产品特点：

• 活化的HRP - 高碘酸盐处理、醛活化的辣根过氧化物酶，可直接偶联到抗体或者其它蛋白质上的伯胺位点（例如，赖氨酸）上。

• 高活性HRP – 酶活性可达 120-200 units/mg; 活化的酶在-20℃条件下至少稳定保存12个月。

• 灵活用量 – 每1毫克量的活化酶就足以与1毫克的IgG反应。

• 定制化 –改变摩尔比，反应缓冲液和pH值，以及其它参数，可实现不同水平的HRP偶联和活性。